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第七章-发酵染菌及防治
细菌培养基 营养肉汤:glucose 10 g, peptone 5 g, beef extract 5 g, NaCl 5 g, distilled water 1000 ml, pH 7.2~7.4。 酚红肉汤:营养肉汤+1% phenol red 3 ml。 营养琼脂:glucose 5 g, peptone 10 g, beef extract 3 g, NaCl 5 g, agar 15-20 g, distilled water 1000 ml, pH 7.2~7.4。 酵母培养基 萨氏培养基(Sabouraud’s agar):glucose 40 g, peptone 10 g, agar 15~20 g, distilled water 1000 ml, pH 5.6。 霉菌培养基 察氏培养基(Czapek’s agar):sucrose 30 g, NaNO3 3 g, K2HPO4 1 g, MgSO4?7H2O 0.5 g, KCl 0.5 g, agar 15~20 g, distilled water 1000 ml, pH 6.6。 * * 《发酵工程》 第七章 发酵染菌及防治 第七章 发酵染菌及防治 《发酵工程》 第七章 发酵染菌及防治 纯种发酵(单菌或混菌);菌种以外的微生物都被视为杂菌。 所谓染菌,是指在发酵培养基中侵入了有碍生产的其它微生物。 几乎所有的发酵工业都有可能遭遇杂菌或噬菌体的污染。染菌的结果,轻者影响产量或质量,重者可能导致倒罐,甚至停产,造成原料、人力和设备动力的浪费。 防止杂菌和噬菌体污染是保证发酵正常进行的关键之一 染菌的影响 造成大量原材料的浪费,在经济上造成巨大损失 扰乱生产秩序,破坏生产计划。 遇到连续染菌,特别在找不到染菌原因往往会影响人们的情绪和生产积极性。 影响产品外观及内在质量 《发酵工程》 第七章 发酵染菌及防治 一、杂菌污染的原因与防治 1、 从染菌的现象分析染菌的原因 1)从染菌的时间分析 ● 早期(如接种后12 h或24 h),除了种子带菌外,主要是培养基或设备灭菌不彻底。 ● 相反,中、后期染菌则可能与中间补料、设备渗漏以及操作不合理等有关,也可能是空气过滤器不严所致。 2)从污染的杂菌类型分析 ● 污染耐热的芽孢杆菌,多数是因培养基灭菌不彻底或设备存在死角所致; ● 污染无芽孢杆菌、球菌等不耐热菌,可能是从蒸汽的冷凝水中带来的,或空气系统不严造成。 3)从发酵罐及批次分析 大批发酵罐染菌是指整个工厂各个产品的发酵罐都出现杂菌现象,而且染的是同一种菌,主要是空气过滤器除菌不净,空气带菌而造成的。 个别发酵罐连续染菌,较多地是由于设备问题而造成的。如阀门的渗漏或罐体破损,特别是蛇形管的穿孔,有时不易察觉。有时设备破损引起的染菌会出现每批染菌时间前移现象。 个别发酵罐偶然染菌的原因最为复杂,各种染菌途径都有可能引起。 《发酵工程》 第七章 发酵染菌及防治 《发酵工程》 第七章 发酵染菌及防治 根据谷氨酸发酵情况分析,染菌原因以设备问题(设备渗漏、管道不严、设备死角)和空气问题(过滤器不严、过滤器失效、过滤器受潮)为主,种子(二级种子染菌)次之,而培养基消毒不透的情况较少。 发酵染菌对不同品种的影响 放线菌由于生长的最适pH为7左右,因此染细菌为多,而霉菌生长pH为5左右,因此染酵母菌为多。 青霉素发酵染菌,绝大多数杂菌都能直接产生青霉素酶,而另一些杂菌则可被青霉素诱导而产生青霉素酶。不论在发酵前期、中期或后期,染有能产生青霉素酶的杂菌,都能使青霉素迅速破坏。 《发酵工程》 第七章 发酵染菌及防治 链霉素、四环素、红霉素、卡那霉素等虽不象青霉素发酵染菌那样一无所得,但也会造成不同程度的危害。如杂菌大量消耗营养干扰生产菌的正常代谢;改变pH,降低产量。 灰黄霉素、制霉菌素、克念菌素等抗生素抑制霉菌,对细菌几乎没有抑制和杀灭作用。 疫苗生产危害很大。现在疫苗多采用深层培养,这是一类不加提纯而直接使用的产品,在其深层培养过程中,一旦污染杂菌,不论死菌、活菌或内外毒素,都应全部废弃。因此,发酵罐容积越大,污染杂菌后的损失也越大。 《发酵工程》 第七章 发酵染菌及防治 2、 防止染菌要点 (1)空气系统 提高空压机进口空气的洁净度、防止空气带油、水及过滤器失效。 如提高空压机吸气口位置并加强压缩前的过滤;防止空气冷却器漏水而进入空气系统;在空气过滤器灭菌时要防止冲翻介质而短
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