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讨论 4.1 不同消毒时间对愈伤组织诱导分化的影响 由于材料茎尖茸毛多，消毒剂不易渗透，茎尖容易污染，延长消毒时间茎尖又会褐变死亡，在消毒液中加入吐温（一种乳化剂）也没有很大作用[13]。本实验中分别采取用0.1%的升汞消毒处理6分钟、8分钟、10分钟，再用无菌水消毒四次作为对比。消毒时间如果为6分钟，由于消毒不充分而导致材料的污染加剧；消毒10分钟，发现材料有变黑的斑块，刀片切口处严重受伤成黑色。对材料造成不可逆的伤害。试验结果表明，以75%的酒精消毒30秒，再用无菌水冲洗三次，0.1%升汞消毒8分钟，用无菌水冲洗四次，未使材料受到伤害，且保证污染率较低，消毒效果较好。 * 4.2 试验中玻璃化现象 在植物生长激素不协调，细胞分裂素浓度过高的情况下会有玻璃化现象的产生[12]。本试验采用了NAA和6-BA两种外源激素的不同浓度配比诱导银叶蓝钟花愈伤组织产生和分化。在9个不同的NAA和6-BA植物激素浓度配比下对愈伤组织进行诱导分化，都有不同程度的玻璃化现象产生。而在丛生苗诱导生根时，玻璃化现象明显减少。造成玻璃化现象的可能原因有2个：①银叶蓝钟花内源激素的干扰、 ②人为原因造成培养基中的外源激素配比不协调。本试验表明在不排除实验材料的内源激素影响条件下，NAA和6-BA的浓度比为1/60是诱导愈伤组织产生和分化相对较好的浓度配比；在诱导生根培养时NAA和6-BA的浓度比为2/1，为较好的浓度配比。 * 4.3 NAA与6-BA配合对生根培养的影响 试验结果表明，NAA与6-BA的浓度比为2/1是银叶蓝钟花较好的生根培养基。根据高的生长激素和细胞分裂素浓度比能够促进生根[14]，若NAA/6-BA的比例大于2，则可提高银叶蓝钟花的生根率。 * 结论 本实验结果为：以75%的酒精消毒30秒，再用无菌水冲洗三次，0.1%升汞消毒8分钟，用无菌水冲洗四次，未使材料受到伤害，且保证污染率较低，消毒效果较好；培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.05mg/L是愈伤组织诱导分化相对较好的培养基；培养基MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.6mg/L是银叶蓝钟花生根培养较好的培养基。 * 参考文献 [1] 洪德元，马黎明.蓝钟花属的系统学研究.植物分类学报，1991,29（1）:25-51 [2] 洪德元，桔梗科的地理分布：关于分布中心问题.植物分类学报，1995,33（6）：521-536 [3]中国科学院昆明植物研究所.云南植物志（第5卷）.蓝钟花属[M].北京：科学出版社. [4]解玮佳，云南特有植物银叶蓝钟花的引种栽培.江西农业学报，2008,20（8）：33-34 [5]康隶善，中国植物志（第73卷）.蓝钟花属(M).北京：科学出版社，1985.5-28 [6]巩振辉 申书兴 植物组织培养.化学工业出版社 2007年8月第一版. [7]石晓东 高润梅 植物组织培养. 中国农业科技出版社 . 2006年5月第一版. [8]中国组培网 [9]印度 M.K 拉兹丹 肖尊安 译 植物组织培养导论 化学工业出版社 2006年5月第一版. [10]吴殿星 植物组织培养. 上海交通大学出版社 2004年. [11]王蒂 植物组织培养实验指导. 中国农业出版社. 2008年五月第一版. [12]王清连 植物组织培养[M] 中国农业出版社. [13]园艺植物组织培养技术.周玉珍 苏州大学. [14] 曹孜玉 刘国民 实用植物组织培养技术教程. 甘肃科学技术出版社. 1996年第一版 * 本试验得到了范眸天老师的悉心指导，以及云南农业科学院花卉研究所解玮佳等老师的大力帮助。在此表示衷心的感谢。 致谢 * * 银叶蓝钟花茎尖组织培养研究 Study on Meristem Culture of Cyananthus argenteus Marq 云南农业大学 园林园艺学院2006级 * 摘 要 以银叶蓝钟花茎尖为外植体，以期筛选出诱导愈伤组织分化和丛生芽生根的最佳培养基。同时研究了银叶蓝钟花组织培养中材料的消毒时间对消毒效果的影响。试验结果表明，培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.05mg/L是愈伤组织诱导分化相对较好的培养基；培养基MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.6mg/L是银叶蓝钟花生根培养较好的培养基。在以75%的酒精消毒30秒后，用0.1%的升汞消毒8分钟，对实验材料的消毒效果相对较好。 关键词：银叶蓝钟花；消毒时间；诱导率；玻璃化 * ABSTRACT The meristem tip of Cyananthus argenteus Marq as explants to induce callus se