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现代分离技术 商丘师范学院化学化工学院 冯翠兰 fengcuilanfan@163.com 电话第一章 绪论 一、什么是分离？ 二、为什么要分离？ 三、怎么评价分离方法的好坏？ 四、分离技术将来的发展方向是什么？ 一、什么是分离？ 第五章 萃取分离法 §5.0 引言 §5.1 溶剂萃取 §5.2 胶团萃取 §5.3 双水相萃取 §5.4 超临界流体萃取 §5.5 固相萃取 §5.6 溶剂微胶囊萃取 4. 萃取率（E） ——在一定条件下被萃取溶质进入有机相的量。 五、影响溶剂萃取的主要因素 1. 萃取剂浓度的影响 2. 酸度的影响 3. 金属离子浓度的影响 4. 温度的影响 5. 盐析剂的影响 6. 萃取剂和稀释剂的影响 七、溶剂萃取新技术 1. 液相微萃取 2. 微波辅助溶剂萃取 3. 加速溶剂萃取 1、液相微萃取（LPME) 2、微波辅助溶剂萃取 ——Microwave assisted solvent extraction, MASE，是一种从固体样品中萃取目标组分的新技术。由于微波加热具有选择性，因此，该方法利用微波加热加速溶剂对固体样品中目标物的萃取。 3、加速溶剂萃取 ——ASE，用于固体或半固体样品中目标组分的萃取。它通过加热、加压、连续自动化操作来加速萃取速度。 §5.2 胶团萃取 一、胶团、胶团萃取的定义及胶团的分类 二、胶团萃取机理 三、影响反胶团萃取的主要因素 一、胶团、胶团萃取的定义及分类 二、 胶团萃取机理 三、影响反胶团萃取的主要因素 1. 表面活性剂的种类与浓度 2. 水相pH值的影响 3. 离子强度的影响 1. 表面活性剂的种类与浓度 2. 水相pH值的影响 3. 离子强度的影响 四、反胶团萃取在生物样品分离中 的应用 §5.3 双水相萃取 §5.4 超临界流体萃取 一、什么是超临界流体及超临界流体萃取 二、超临界流体萃取的特点 三、超临界流体萃取常用工艺流程 四、超临界流体萃取的主要影响因素 §5.5 固相萃取 一、固相萃取定义及原理 二、 主要萃取模式 三、固相萃取操作的基本步骤 四、固相萃取新技术——固相微萃取 §5.6 溶剂微胶囊萃取 微胶囊（microencapsule）是一种通过成膜物质将囊内空间与囊外空间隔离开来，形成特定几何结构的微型容器，其直径一般为1～1000μm。 本章小节： (1)不同的表面活性剂形成的反胶团大小不同。若反胶团太小，蛋白质无法进入，溶解度降低，分配比小。 (2) 生物物质的萃取分离应避免在强酸、强碱条件下操作。阳离子型反胶团适合萃取分子量较大，等电点较低的蛋白质；阴离子型反胶团适合萃取分子量较小，等电点较高的蛋白质。 (3) 在一定的浓度范围内，表面活性剂浓度增大，可能使胶团的大小和数目增加，从而提高分配比，但超过一定的浓度后，胶团之间的相互作用会发生变化，使胶团界面受损，致使蛋白质萃取率下降。 表面活性剂浓度对质粒pUT649萃取的影响 阳离子表面活性剂TOMAC，构成反胶团 pHpI时，蛋白质带正电 阴离子表面活性剂 pHpI时，蛋白质带负电 阳离子表面活性剂 阴离子表面活性剂AOT: 顺-二-(2-乙基己基（丁二酸酯磺酸钠） 细胞色素C: pI=10.6 添加11-烷基咪唑啉 阴离子表面活性剂AOT 反胶团内表面带负电荷 溶菌酶 pI=11.1 pH11.1 溶菌酶的萃取率接近100％ pH11.1 溶菌酶的萃取率急剧下降 离子强度增加，一方面减少了带电蛋白质分子与反胶团内表面电荷之间的静电相互作用，从而降低蛋白质在反胶团中的溶解度；另一方面，减少了表面活性剂极性基团间的静电排斥作用，导致反胶团变小，对水和生物分子的增溶作用减小。 低离子强度有利于蛋白质的萃取，高离子强度有利于蛋白质的反萃取。 例如：阴离子表面活性剂AOT-异辛烷体系 核糖核酸酶，细胞色素C，溶菌酶 pI 4.58 10.6 11.1 第一步： pH=9, [KCl]=0.1mol/L 核糖核酸酶：pHpI，带负电荷，不溶于胶团 细胞色素C、溶菌酶：pHpI，带正电荷，溶于胶团 核糖核酸酶留在水相 阴离子表面活性剂AOT-异辛烷体系 核糖核酸酶，细胞色素C，溶菌酶 pI 4.58 10.6 11.1 第二步： pH=9, [KCl]=0.5mol/L 核糖核酸 细胞色素C 溶菌酶 细胞色素C，胶团中溶解度大大降低，进入水相。 溶菌酶，留在有机相。 分离出细胞色素C 阴离子表面活性剂AOT-异辛烷体系 核糖核酸酶，细胞色素C，溶菌酶 pI 4.58 10.6 11.1 核糖核酸 细胞色素C