结核分枝杆菌katG和inhA基因突变的研究Ξ.PDFVIP

3·62 · 中国抗生素杂志1998年10月第23卷第5期 结核分枝杆菌 katG 和 inhA 基因突变的研究 吴雪琼 　张俊仙　庄玉辉　张晓刚　李国利　何秀云 (解放军309医院, 北京100091) 　　摘　要　为了解结核分枝杆菌耐异烟肼( IN H ) 分离株 katG 基因和 inhA 调节序列的突变情况, 探 讨其在 IN H 耐药性中的可能作用。应用聚合酶链反应(PCR ) 和 PCR 单链构象多态性(SSCP) 方法对62 株结核分枝杆菌临床分离株的 基因和 调节序列进行分析。 分析结果显示: 基因和 katG inhA PCR katG 调节序列的敏感性为1～ 10 ; 其引物 扩增都具有较高的特异性。以 标准株为对 inhA pg DNA PCR H 37R v 照, 13株敏感株中, 12株 katG 基因扩增产物 SSCP 泳动正常, 1株 katG 异常; 24株耐非 IN H 抗结核药物 株中, 8株 katG SSCP 异常; 上述27株的 inhA 调节序列 SSCP 均泳动正常。25株耐 IN H 株中, 3株 katG 基因 PCR 扩增阴性, 22株 katG 扩增阳性, 其中16株 SSCP 泳动异常; 4株 inhA 调节序列 SSCP 泳动异 常, 其 katG 基因 SSCP 也异常。结果表明, 某些结核分枝杆菌 IN H 耐药性可能是由于其 katG 基因完全 缺失、 基因或 调节序列突变所致, 但某些菌株也可能与其无关, 是其它耐药基因所致或存在 katG inhA 多种机制, 尚需进一步探讨。 关键词　药物耐受性　聚合酶链反应(PCR ) 　单链构象多态性 (SSCP) 　结核　分枝杆菌 　　1990年第三次全国结核病流行病学调查结果 IN H 耐药性中的可能作用。 表明, 我国的结核病疫情和耐药情况都相当严重, 1　材料和方法 患病人数已由1985年的570万上升至1990年的593 1. 1　菌株来源和药敏试验 万, 初始耐药率为28. 1% , 继发耐药率为41. 16种分枝杆菌和5种非分枝杆菌标准株来源 1% [ 1 ]。美国已发生多起对多种抗结核药物耐药结 于中国药品生物制品鉴定所; 62株结核分枝杆菌 [ 2 ] 临床分离株分别来源于北京市结核病控制中心和 核病的爆发流行 。耐药问题已成为结核病防治 工作中迫切需要解决的难题之一。 河北省胸科医院, 根据“结核病诊断细菌学检验规 异烟肼( ) 程”进行菌种鉴定和药敏试验。耐药标准: 1 IN H 自1952年用于抗结核以来, 作 g m l 为预防用药以及结核病治疗方案的一线药物已40 和10 分别为低、高度耐药。 g m l 多年了, 结核分枝杆菌对其高度敏感 ( 0. 1.