使用Agilent1290Infinity二维液相色谱解决方案分析单克隆抗体酶解物.PDF

使用Agilent 1290 Infinity 二维液相 色谱解决方案分析单克隆抗体酶解物 应用简报 生物治疗药物与生物仿制药 作者 摘要 当前，单克隆抗体和重组蛋白等蛋白质类生物药物广泛应用于治疗各种严重威胁人类生 ， ， Gerd Vanhoenacker Koen Sandra 命的疾病，包括癌症和自身免疫性疾病。蛋白质治疗远远比小分子药物的治疗复杂，因此， ， ， Isabel Vandenheede Frank David 阐明这种复杂性成为一个分析难题。 Pat Sandra 本文使用配备 DA D 检测器的Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案，论证了采用 Research Institute for Chromatography 全二维液相色谱 (LCx LC) 分析单克隆抗体胰蛋白酶酶解物的应用潜力。 Kennedypark 26 B-8500 Kortrijk, Belgium Metablys Kennedypark 26 B-8500 Kortrijk, Belgium Udo Huber, Edgar Naegele Agilent Technologies, Inc. Waldbronn, Germany 前言 隆抗体曲妥单抗的同一性和纯度评价的肽谱 本文报道了强阳离子交换 (SCX) 色谱联用反 分析方法。曲妥单抗，商品名赫赛汀，是一 相液相色谱 (RPLC) ，对于肽的分析，该组 在各种疾病的治疗中，由重组 DNA 技术制 个分子量为 150 kDa 的大分子，用于治疗 合提供了良好的正交性3 。采用一个双定量 造的治疗性大分子正变得越来越重要。据估 HER2 阳性转移性乳腺癌。胰蛋白酶酶解后， 环接口将馏分从第一维转移到第二维中，并 计，目前全球的蛋白质治疗市场 （单克隆抗 预计会生成超过 100 种具有宽动态浓度范围 保持原有 （第一维中获得的）分离度。分析 体 (mAb) 及其它重组蛋白质）占据大约全部 的不同理化性质的肽 （图 1）。这是一个复 中使用Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱 医药市场的20 %。未来十年内，批准的新药 1 杂的分析难题，需要极高的分离性能。全二 解决方案。我们强调了一些关键结果，并论 中超过50 % 都将是生物药物 。 维 LCx LC 可以大幅提高色谱分离度，只要 证了系统的性能。 在这些大分子的开发和使用期间，需要对它