第三章-DNA的复制-2.pptVIP

cycling amplification 5‘ 3‘ 3‘ 3‘ 3.2.10复制的速度 E.coli 37 ℃ 0.5 h 105 bp/min mammalian cell 22-25hrs 500-5000 bp/min 140公里/小时 3.3 真核DNA的复制 DNA replication at phase S of cell cycle S 6-8hs M 1h G2 3-4hs G1 12hs G1 preparing for DNA replication (cell growth) S DNA replication G2 a short gap before mitosis M mitosis and cell division 3.3.1 真核生物与原核生物复制子的比较 3.3.2真核细胞DNA复制的起始 大约 20-50 串联复制子在 S-phase同时起始复制。 S-早期: 常染色质复制 S-后期: 异染色质复制 中心粒 和端粒的最后复制 3.3.3 DNA复制酶类 DNA 聚合α 主要是引物合成 DNA 聚合δ 主要负责ＤＮＡ复制的酶，参与先导链和滞后连的合成 DNA 聚合ε 主要功能可能是在去掉ＲＮＡ引物后把缺口补全 DNA 聚合γ 线粒体ＤＮＡ的复制 DNA 聚合β 可能在DNA损伤的修复中起作用 3.3.4 真核DNA复制酶的主要特点 DNA聚合酶α合在RNA引物及一小段DNA (intrator DNA，iDNA),形成RNA-DNA引物，然后DNA聚合酶α转换为DNA聚合酶δ，再由DNA聚合酶δ负责延伸前导链及冈崎片段。 DNA聚合酶δ无合成引物功能，只能有效地延伸DNA引物，对RNA引物延伸功能很弱。 3.3.5 DNA 复制过程中的组蛋白 复制经过时，DNA 从组蛋白上解离 当复制叉通过以后，组蛋白立即结合上去 DNA复制的同时，新的组蛋白也在合成 3.3.6 端粒的复制 3’-OH ? 3‘ 5‘ 5‘ 3‘ 3’-OH ? 四膜虫属的断粒酶作用 G G hoogsteen bond Tetraplex helix G链 –T2G4-----TTGGGG TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGG C链--A2C4----- G链 –T2G4-----TTGGGG t t g g g g t t g C链--A2C4----- AACCCCAA g g g g t t g g g Primase AACCCC AACCCCAACCCCAACCCCAACCC DNA pol or 5‘ 3‘ T T T G G G G G G G G G G G GG G G G G G T T T T T T GGGGTTTGGGGTTTGGGGTTT 真核生物染色体端粒DNA结构 结 构 特 点 Linked by Hoogsteen Bonding G G G G Telomerase activity is repressed in somatic cells of multicelluar organisms resulting in a gradual shortening of the chromosome with each cell generation. As this shortening reaches informational DNA, the cells senesce and die. 细胞分裂 端粒阈值 细胞分裂次数与端粒长短呈正比 端粒长短 端粒酶活 Harley (1989) 端粒的重复片段为探针检测 胎儿细胞株 婴儿细胞株 青年细胞株 老年细胞株 年龄 小 大 端粒长度 长 短 早老性侏儒症的端粒明显较正常人短 “多莉”的衰老 XXXY Chapter 3 DNA的复制 DNA Replication Watson Crick: 一种遗传物质，必须能行使两种功能，即自我复制和对细胞的高度特异性的影响。 遗传物质的基本属性： 基因的自我复制 控制性状的表达 3.1 基本概念 DNA复制：亲代双链DNA分子在DNA聚合酶的作用下，分别以每单链 DNA分子为模板，聚合与自身碱基可以互补配对的游离的dNTP, 合成出两条与亲代DNA分子完全相同的子代DNA分子的过程。 3.1.1 复制机理的复杂性 D.S. DNA S.S. DNA 能量的供求 超螺旋 线状，开环状 多种复制相关的蛋白是如何作用的？ 复制的准确性：修复、校正 DNA复制速度：E.coli 高速解旋 112 km/h