4第五章DNA的复制、突变、损伤修复和重组.pptVIP

A replication eye forms a theta structure in circular DNA. 复制起始与延伸的总结 3+4 Dna A-C(A被捆-复制叉+召集；6B主体；6C装配) SSB DnaB召集引物酶-合成RNA引物 延续 1. DNA聚合酶Ⅲ（10,3,22） 2.DNA聚合酶Ⅰ（去引物）——缺刻平移——DNA连接酶连接“冈崎片段” 捆-开-解-盖-先导连续-后随冈崎-Ⅰ去+缺刻-连 真核生物DNA复制特点 1.起点和速度 真核生物起始点多 原核生物1个起始点 完成全部复制，再开始新的复制 起始点可连续复制 复制速度慢（1/20） 复制速度快 [多点同时，总耗时比真核生物少] 真核生物DNA复制特点 2.DNA聚合酶: α、β、γ、δ、ε五种 α和δ——主 γ为线粒体复制酶；ε为修复酶 δ需要-增殖细胞核抗原（PCNA）-作为复合因子 PCNA——大肠杆菌中的DNA聚合酶Ⅲ的β亚基，形成环状卡子，增强酶的持续合成能力 两个蛋白因子：复制蛋白A和复制因子C RP-A——SSB；RF-C——夹子装卸器 （PCNA在DNA链上的装卸） 真核生物DNA复制特点 3.RNA引物和冈崎片段 真核生物 原核生物 引物10个核苷酸 引物几十个核苷酸 冈崎片段100-200个核苷酸 1000-2000个核苷酸 真核生物DNA复制特点 4.端粒和端粒酶 原核生物：复制后可填补去除引物后的5′末端的空缺 真核生物：通过端粒和端粒酶解决此问题 端粒和端粒酶 染色体上有一个帽子，它的名字叫端粒-作用是保持染色体的完整性。 Telomere:真核生物染色体线性DNA分子末端的结构部分，通常庞大呈粒状。（见图） DNA每复制一次，端粒就缩短一点。当端粒缩短至一定的长度时，细胞就会停止分裂甚至发生细胞死亡，因而被称作细胞寿命的“有丝分裂钟”。 在某些癌细胞中，端粒酶不断修复延长受损的端粒，防止端粒因细胞分裂而有所损耗，从而使得细胞获得无限增殖分裂的能力。 端粒酶简介 端粒学说 由Olovnikov提出，细胞在每次分裂过程中都会由于DNA聚合酶功能障碍而不能完全复制它们的染色体，因此最后复制DNA序列可能会丢失，最终造成细胞衰老死亡。 1.端粒具有维持染色体结构完整性的作用。 2.端粒酶是一种逆转录酶，由RNA和蛋白质组成，是以自身RNA为模板，合成端粒重复序列，加到新合成DNA链末端。 3.在人体内端粒酶出现在大多数的胚胎组织、生殖细胞、炎性细胞、更新组织的增生细胞以及肿瘤细胞中。 但是许多问题用端粒学说还不能解释。 1.有人就不同年龄供体角膜内皮细胞的端粒长度进行研究发现角膜内皮细胞内端粒长度长期维持在一个较高的水平，而端粒酶却不表达。2.Kippling发现，鼠的端粒比人类长近5-10倍，寿命却比人类短的多。 看来端粒的长度缩短是衰老的原因还是结果尚需进一步研究。 由许多有固定起点的 独立的复制元完成复制双向复制 Unwinding DNA from nucleosomes: 50 bp/sec, need helicases and replication protein A (RP-A) DNApolα是否具有引发酶活性—张玉静、阎隆飞、Molecular Biology都认为有 而孙乃恩书－－－DNA引发酶与DNApolα紧密结合-------证据是其能被50%乙二醇洗脱 PCNA: proliferating cell nuclear antigen, similar to ? subunit of E. coli pol III DNApolα可能用于起始阶段的复制（合成DNA） δ 德尔塔；ε 伊普西龙；γ 伽马 引发酶产生的引物为RNA、DAN？ Licensing factor: required for initiation and inactivated after use Can only enter into nucleus when the nuclear envelope dissolves at mitosis 因为所有原核生物和噬菌体的DNA分子只有一个 G基四重线。图中每个连续T2G4单位的第二个G组成了这个四重线一部分，剩下的重复单位呈环状突