[医药卫生]紫外第二讲.ppt

（2）邻位或间位取代 两个基团产生的 λmax 的红移值近似等于它们单取代时产生的红移值之和。 例： 苯 邻羟基苯甲酸 苯酚 苯甲酸 E2带λmax(nm) 203.5 236.5 210.5 230 △λ 0 33.5 7 26.5 1.3 仪器 紫外-可见分光光度计 一、基本组成 general process 光源 单色器 样品室 检测器 显示器 1. 光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在350～2500 nm，最佳使用范围是360～1000 nm 。 紫外区：氢、氘灯。发射150～400 nm的连续光谱。 2.单色器 将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出任一波长单色光的光学系统。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅； ④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝； ⑤出射狭缝。 3.样品室 样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。 4.检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。 5. 结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理。 二、分光光度计的类型 1.单光束 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。 2.双光束 自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 3.双波长 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快速交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△?= 1～2nm。 溶剂的选择 有机药物的紫外光谱都用溶液测定，选用溶剂时应考虑： （1）样品的λmax和峰形都受溶剂极性的影响，选用溶剂时必须考虑溶剂的影响； （2）若测量用的波长范围在可见光区，那么可选用任何无色溶剂； （3）若测量用的波长范围在300~400nm，溶剂在250nm以上区域应无吸收； （4）若测量用的波长范围在300nm以下，溶剂在200nm以上区域应无吸收； （5）测定时对溶剂的纯度有明确要求。 1.1.4 实验技术 1.4 紫外光谱的解析及应用 药物的紫外光谱仅反映分子中生色团及助色团的特性，单纯依赖紫外光谱难以确定分子结构。只有把紫外光谱与红外、核磁共振和质谱等相结合才能得出正确可靠的结构。在研究工作中，紫外光谱用于推测功能基，阐明共轭体系中取代基的位置、种类和数目。 1.4.1.推测功能基 （1）化合物在 200-400nm 无吸收峰，说明为饱和化合物或单烯。 （2）在220-250nm内显示强的吸收（?近10000或更大），这表明K带的存在，即存在共轭的两个不饱和键（共轭二烯或?、? 不饱和醛、酮） （3）在250-290nm内显示中等强度吸收，且常显示不同程度的精细结构，说明苯环或某些杂芳环的存在。 （4）在250-350nm内显示中、低强度的吸收，说明羰基或共轭羰基的存在。 （5）300nm以上的高强度的吸收，说明该化合物具有较大的的共轭体系。若高强度吸收具有明显的精细结构，说明稠环芳烃、稠环杂芳烃或其衍生物的存在。 1.4.2.推测异构体 互变异构： 乙酰乙酸乙酯的酮式：π→π*跃迁λmax=204 nm；无共轭 烯醇式： π→π*跃迁λmax=243nm (εmax=18000) 根据紫外光谱可以判定平衡混合物中存在的主要异构体。 顺式： λmax=220nm； εmax=25000 λmax=280nm； εmax=10500 反式： λmax=229nm； εmax=15800 λmax=295nm； εmax=25000 λmax=308nm； εmax=25000 λmax=320nm； εmax=15800