第九章 特殊染色PPT.ppt

苏丹Ⅲ 【结果】?胶元纤维呈黄色，网状纤维成黑色。 ?【染色结果】?网状纤维染灰黑色，胶元纤维红色，基质 黄色。 三、弹力纤维染色法 弹力纤维较细，直径0.2-1微米，且坚固，弹性大，容易伸展，纤维分枝连接成网，HE染色与胶原纤维着色相似，若用弹力纤维染色法，则可分辨的很清楚。 Weigert氏弹力纤维染色法： 标本用Zenker氏液，酒精或10%甲醛固定均可。 石蜡或冰冻切片。 脱蜡至水。 水洗后，加入Weigert氏染色液2-6小时或更长的时间，一般依染色液的新旧而定 。 取出后，直接浸入1%盐酸酒精或酒精中进行分化。 如需复染细胞核，可染于明矾苏木素溶液中10分钟。 冲洗后，可再以V G氏染液作对比染色1-2分钟。 95%酒精分化、脱水、透明、封固。 试剂配制： 盐基性复红（碱性品红） 2g 间苯二酚（雷锁辛） 4g 蒸馏水 200ml 30%三氯化铁水溶液 25ml 95%酒精 200ml 浓盐酸 4ml 先将盐基性复红（碱性品红）溶于200ml的蒸馏水中， 加入4-5g间苯二酚，加温煮沸（不停搅拌）， 然后加入25ml的30%三氯化铁水溶液，继续搅拌煮沸2-5分钟，冷却后过滤倾去滤液，将滤纸及沉淀物置于温箱中烘干。 而后将滤纸和干燥的沉淀物一并投入烧杯，加200ml 95%酒精，小心隔水加热，徐徐搅拌使沉淀溶解，然后弃去滤纸冷却后，补足因加热蒸发的酒精。 最后加入4ml的盐酸即可应用。（对苯二酚可代替间苯二酚）。 【注意事项】 Weigert氏弹力纤维染色的配制已有许多改变，盐基性复红（碱性品红）可由其它盐基性染料取代， 配制时如将结晶紫1克加盐基性复红1克，则弹力纤维染成兰绿色；全用甲紫或结晶紫，弹力纤维则呈暗绿色。 【染色结果】 弹力纤维蓝黑色，胶原纤维染成红色，肌纤维染成黄色。 小动脉光镜图 (弹性染色) Verhoeff氏弹力纤维染色法： 操作方法： 切片常规脱蜡。 Verhoeff染液15-60分钟。 以2%三氯化铁分化（镜下控制）。 水洗再以95%酒精洗去碘。 流水洗。 以HE或VG氏染液复染。 脱水、透明、封固。 【染色结果】 弹力纤维蓝黑色，其它组织视复染而定。 注意事项： 这种染色法染液配制简单，但对微细弹力纤维不如Weigert氏效果好。 试剂配制： 将1克苏木素加热溶于20ml的无水酒精， 冷却后，加1%三氯化铁水溶液8ml搅拌； 再加入 8ml的Lugoi碘液（碘1克，碘化钾2克，蒸馏水100ml）搅拌混合而成。 染液仅可存放2-3周。 应用： 1.显示皮肤组织中弹力纤维的变化 2.显示鉴别心血管疾病 3.显示呼吸系统和肾脏疾病时弹力纤维的变化 4.对弹力纤维瘤的诊断有决定作用 四、Masson三色染色法 Masson三色染色法是由Mallory氏苯胺蓝菊黄G发展改良而来，但对于固定液有一定的选择性，虽然任何固定液固定后的组织可进行染色，但最好是用Zenker氏固定液或Bouin氏固定液固定组织。福尔马林固定的标本切片在染色前以3%升汞作第二次固定一小时以上，则可增强着色效果。 操作方法： (1)切片常规脱蜡至水，蒸馏水洗； (2)Weigent氏苏木素液染核5分钟； (3)自来水洗； (4)1%盐酸分化 (5)自来水洗； (6)丽春红--酸性品红溶液染5-8分钟； (7)1%醋酸水溶液洗； (8)1%磷钼酸分化（1-3分钟）直到各种成分被染清晰（胶原纤维呈淡红色，肌纤维、纤维素呈鲜红色） (9)2%亮绿液染2-5分钟（或用2%苯胺蓝水溶液替代） (10)水洗（快速） (11)常规脱水、透明、封片。 【染色结果】 胶原纤维绿色(亮绿)（或苯胺蓝,蓝色）肌肉、纤维素红色，红细胞橘黄色，核蓝黑色。 试剂配制： 1．丽春红-品红溶液 丽春红 0.7g 酸性品红 0.3—0.5g 冰醋酸 1ml 蒸馏水 99ml 2．1%冰醋酸水溶液 冰醋酸 1ml 蒸馏水 99ml