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猪鹦鹉热衣原体CJ4株生物学特性研究 　　摘要：从发病猪分离出鹦鹉热衣原体ＣＪ４株，该菌株对青霉素敏感，不被磺胺嘧啶钠所抑制；能够致死６～７日龄鸡胚，其ＥＬＤ５０为１０-７．69/０．３ ｍＬ；用该毒株制备的疫苗免疫小鼠可以抵抗衣原体强毒的攻击，具有较好的免疫原性。 　　关键词：猪衣原体ＣＪ４株；生物学特性；免疫原性 　　中图分类号：Ｓ８５２．６７；Ｓ８５８．２８ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８11423－4902-03 　　 　　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ＣＪ４ Ｓｔｒａｉｎ ｏｆ Ｓｗｉｎｅ Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｓｉｔｔａｃｉ 　　 　　ＬＩＵ Ｚｅ－ｗｅｎ，ＴＩＡＮ Ｙｏｎｇ－ｘｉａｎｇ，ＺＨＯＵ Ｄａｎ－ｎａ，ＹＵＡＮ Ｆａｎｇ－ｙａｎ，ＹＡＮＧ Ｋｅ－ｌｉ，ＬＩＡＮＧ Ｗａｎｇ－ｗａｎｇ， 　　ＤＵＡＮ Ｚｈｅｎｇ－ｙｉｎｇ，ＧＵＯ Ｒｕｉ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｓｉｔｔａｃｉ ＣＪ４ ｓｔａｉｎ was ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｉｌｌ ｓｗｉｎｅ． Ｉｔ ｗａｓ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｔｏ ｔｈｅ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ ａｎｄ ｗａｓ ｕｎｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｓｕｌｆａｄｉａｚｉｎｅ ｓｏｄｉｕｍ． Ｉｔ ｃｏｕｌｄ ｋｉｌｌ ｔｈｅ ｃｈｉｃｋ ｅｍｂｒｙｏ ｏｆ ６~７ ｄａｙｓ ａｇｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｔｉｔｅｒ ＥＬＤ５０ ｗａｓ １０-７．69／０．３ ｍＬ． Ｔｈｅ ｍｉｃｅ ｉｍｍｕｎｉｚｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｍａｄｅ ｏｆ ＣＪ４ ｓｔｒａｉｎ ｃｏｕｌｄ ｒｅｓｉｓｔ ｔｈｅ ａｔｔａｃｋ ｆｒｏｍ Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｖｉｒｕｌｅｎｔ ｓｔｒａｉｎｓ ａｎｄ ｉｔ ｈａｄ ｗｅｌｌ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄs： sｗｉｎｅ Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｓｉｔｔａｃｉ； ＣＪ４ sｔｒａｉｎ； bｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ； ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ 　　衣原体病是由衣原体科衣原体属鹦鹉热衣原体所引起的人畜共患传染病，能使多种动物、禽类和人发病［１］。猪衣原体病是由鹦鹉热衣原体引起的繁殖障碍等多种疾病的总称，各年龄段的猪均能感染，但临床表现有所不同。妊娠母猪主要表现为流产、死胎、产弱仔和围产期新生仔猪大批死亡；公猪发生睾丸炎、附睾炎、尿道炎；断奶仔猪常会发生肺炎、肠炎、多发性关节炎等，病死率较高。该病常给养猪生产带来重大的经济损失。 　　目前对猪衣原体病的早期感染可用四环素、土霉素、金霉素等多种抗生素治疗，但由于其细胞内寄生性引起的隐性、持续性的感染以及长期使用抗生素所造成的耐药性增加等因素，使得使用抗生素并不能从根本上控制该病。因而最有效的防治措施就是接种安全、有效的疫苗。 　　猪鹦鹉热衣原体ＣＪ４株是从发病猪体内分离出来的具有良好免疫原性的菌株，对其生物学特性进行了研究，现报道如下。 　　１ 材料与方法 　　１．１ 试验材料 　　猪鹦鹉热衣原体ＣＪ４菌株由本实验室分离、鉴定和保存；ＳＰＦ鸡胚购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司，本实验室恒温箱培养６～７日龄时用于试验；试验用昆明小鼠购自湖北省医学科学院实验动物中心，饲养于湖北精牧兽医技术开发有限公司试验动物房。 　　１．２ 试验方法 　　１．２．１ 培养特性 以鸡胚卵黄囊膜悬液接种８～１０ ｇ小鼠，腹腔注射０．５ ｍＬ／只，４～５ ｄ后取小鼠脾脏和腹液涂片，用姬姆萨氏法染色，显微镜下观察。 　　１．２．２ 药物敏感性试验 　　青霉素敏感性试验：用鸡胚卵黄囊膜研磨液进行试验。将鸡胚卵黄囊膜研磨液用灭菌的0.9%的生理盐水作１０－１、１０－２、１０－３、１０－４、１０－５、１０－６、１０－７稀释，分成２份，一份于每毫升鸡胚卵黄囊膜研磨液中分别加青霉素２ ５００ Ｕ，在４ 下作用４ ｈ，分别在卵黄囊内接种６～７日龄鸡胚５枚，每胚接种０．３ ｍＬ；另一份不添加青霉素，各取０．３ ｍＬ于卵黄囊内接种６～７日龄鸡胚５枚作为对照。 　　磺胺嘧啶钠敏感性试验：用鸡胚卵黄囊膜研磨液进行试验。将鸡胚卵黄囊膜研磨液用灭菌的0.9%的生理盐水作１０－１、１０－２、１０－３、１０－４、１０－５、１０－６、１０－７稀释，分成２份，一份于每毫升鸡胚卵黄液中分别加入磺胺嘧啶钠１０．０、７．５、５．０和１．０ ｍｇ，在４ 下作用４ ｈ，分别于卵黄囊内接种６～７日龄鸡胚５枚，每胚接种０．３ ｍＬ；另一份不添加磺胺嘧啶钠，各取０．３ ｍＬ于卵黄囊内接种６～７日龄鸡胚５枚作为对照。 　　１．２．３ 毒力试验 以鸡胚卵黄囊膜悬液于卵