紫外辐射灭活大黄鱼和黄姑鱼精子及其激活大黄鱼卵子-中国水产科学.PDFVIP

中国水产科学 2017 年 11 月, 24(6): 12031212 Journal of Fishery Sciences of China 研究论文 DOI: 10.3724/SP.J.1118.2017.17130 紫外辐射灭活大黄鱼和黄姑鱼精子及其激活大黄鱼卵子发育为胚 胎的效果 1, 2 2 1, 2 1 1 1, 3 2, 3 汪倩凤 , 沈伟良, 刘成 , 王迪, 侯聪聪 , 竺俊全 , 吴雄飞 1. 宁波大学 教育部应用海洋生物技术重点实验室, 浙江 宁波 315211; 2. 宁波市海洋与渔业研究院, 浙江 宁波 315012; 3. 浙江省海洋高效健康养殖协同创新中心, 浙江 宁波 315211 摘要: 为探讨大黄鱼(Larimichthys crocea)和黄姑鱼(Nibea albiflora)精子的紫外辐射灭活适宜剂量及其激活大黄鱼 : 卵子发育为胚胎的效果, 以 Ringer 氏液为稀释液, 按 1 30 稀释大黄鱼和黄姑鱼精子, 采用自制紫外灭活装置[紫 外辐射强度2200 µW/(cm2 ·s), 紫外波长254 nm]对这2 种鱼的精子进行紫外照射处理及活力测定, 然后与正常大黄 鱼卵子进行人工授精, 授精后一部分卵未作冷休克处理, 另一部分卵进行了冷休克处理(受精2 min 30 s, 3 ℃海水, 冷休克 10 min), 并进行了早期胚胎成活率和仔鱼孵化率的测定与比较。结果显示: 1)大黄鱼和黄姑鱼精子的激活率 与紫外照射处理时间呈负相关, 精子的快速运动时间变化呈典型的Hertwig 效应。2)未冷休克组中大黄鱼和黄姑鱼 诱导的早期胚胎成活率与精子的紫外照射时间总体呈负相关, 而仔鱼孵化率呈Hertwig 效应。3)冷休克组中大黄鱼 和黄姑鱼精子诱导的早期胚胎成活率和仔鱼孵化率随紫外照射时间的增加呈Hertwig 效应, 分别于2 min 20 s 和 1 min 30 s 时达相对峰值, 此时, 大黄鱼早期胚胎成活率和仔鱼孵化率分别为(38.3±4.3)%和(66.5±5.1)%, 黄姑鱼早期 胚胎成活率和仔鱼孵化率分别为(43.3±3.3)%和(67.7±6.3)% 。分析认为, 大黄鱼和黄姑鱼精子遗传失活的紫外辐射 2 2 剂量分别以308 mJ/cm 和 198 mJ/cm 为佳。本研究旨在为大黄鱼雌核发育技术的改进提供依据。 关键词: 大黄鱼; 黄姑鱼; 紫外照射; 精子活力; 胚胎成活率; 孵化率 中图分类号: Q96 文献标志码: A 文章编号: 10058737(2017)06120310 精子遗传失活是雌核发育的首要环节。精子 射剂量有助于提高精子灭活的效果及雌核发育的 灭活的主要方式有电离辐射(X 射线和γ射线) 、紫 成功率。目前, 在鱼类育种中采用紫外灭活精子 外辐射及化学药品处理等[1] 。其中, 紫外辐射法安 成功诱导雌核发育研究报道较多, 其中徐连伟等[3] 全、实用、易操作, 成为精子灭活最常用的手段 研究发现, 虹鳟(Oncorhynchus mykiss)精子的最适 之一。精子遗传失活的关键在于利用紫外线充分 紫外辐射计量为32 mJ/cm2 , 在授精40 min 后于 破坏精子的染色体, 但仍保留其入卵的能力, 能 26 ℃水浴 15 min 所获得的雌核发育率最高, 育成 够激动卵子进行