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机械创伤诱导皮肤成纤维细胞去分化的实验研究.pdf

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· 84· 2017 InfectInflammRep,V01.18,No.2,June ·论 著· DOI:10.3969/j.issn.1672·8521.2017.02.002 机械创伤诱导皮肤成纤维细胞去分化的实验研究 陈泽林 史春梦 (第三军医大学军事预防医学院全军复合伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室, 重庆市纳米医药工程技术研究中心,重庆400038) 【摘要l 目的:研究机械创伤是否能诱导皮肤成纤维细胞发生去分化。方法:建立体外培养细胞划痕损伤模型和体 内全层皮肤损伤模型,应用免疫荧光染色、免疫组织化学、蛋白质印迹、转录组测序、siRNA等方法,检测机械创伤后 成纤维细胞的形态、增殖情况、干细胞相关标志物的表达、集落形成能力、表达谱等的变化。结果:机械创伤后成纤维 细胞逐渐变小变圆,发生类干细胞形态转变,并于创伤后36h被激活而发生明显增殖,且创伤后成纤维细胞的激活不受 创伤严重程度的影响。机械创伤后成纤维细胞中的干细胞标志物Sox2、波形蛋白的表达鹳显增强,集落形成能力也明显 提高。体内实验也发现创面肉芽组织中出现大量Sox2阳性细胞。表达谱分析发现成纤维细胞的多能干细胞通路及相关 调控分子表达明显增强。机械划痕后2h创缘成纤维细胞中的总B-catenin和ser675磷酸化的B—catenin的表达较 对照组明显增强;应用13-cateninsiRNA抑制成纤维细胞内的B-catenin表达后,机械创伤后创缘成纤维细胞中的 Sox2阳性细胞几乎消失。结论:机械创伤可诱导皮肤成纤维细胞的去分化:B—catenin介导了机械创伤后成纤维细胞 的去分化过程。 关键词 成纤维细胞 去分化 机械创伤 studiesOildedifferentiationofskinfibroblastsinducedmechanicaltrauma Experimental by Chen ofCombined of and Trauma,Burns Zelin,ShiChunmeng+.InstituteInjury,StateKeyLaboratory Combined CenterforNanomedicine ofPreventive Injury,Chongqing EngineeringTechnologyResearch,College Medical 40003 8,China Medicine,ThirdMilitary University,Chongqing author:Shi +correspondingchunmeng(E-mail:shicm@sina.com) Abstract whethermechanicaltraumacouldinducededifferentiationofskinfibroblasts. Objective:Tostudy Methods:Thescratchwoundmodelofcellsculturedinvitroandthefull—thicknessskin modelinvivowere

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