己烯雌酚对人类高位和低位隐睾睾丸引带细胞的影响.pdfVIP

310 中国医药生物技术 2017 年8 月第12 卷第4 期 Chin Med Biotechnol, August 2017, Vol. 12, No. 4 DOI: 10.3969/j.issn.1673-713X.2017.04.004 ·论著· 己烯雌酚对人类高位和低位隐睾 睾丸引带细胞的影响 王冰洁，周君梅，李玲玲，陈方 【摘要】 带细胞的微丝骨架并抑制其增殖[8] ，其对人类睾丸 目的 研究外源性雌激素己烯雌酚（DES ）在体外对高位和 引带的影响尚未见报道。DES 是否通过影响睾丸 低位隐睾患儿睾丸引带细胞的影响。 引带，继而影响到睾丸的下降和停留位置尚有待 方法 以麻醉下未降睾丸的位置位于内环口以上的腹腔型 研究。 隐睾为高位组，已出内环口但未出外环口的腹股沟管型隐睾 基于以上原因，本实验拟首先对人类高位及低 为低位组，分别收集高、低位隐睾患儿术中的废弃引带，经 位隐睾睾丸引带进行原代细胞培养、观察其形态差 IV 型胶原酶消化后原代培养、比较其形态和细胞骨架的差 异，在此基础上进一步研究外源性 DES 对两组细 别；将两组细胞分别培养于溶剂对照组（DMSO ）和 DES 浓 胞的作用及其差异，探寻其与高、低位隐睾发生的 度梯度为 0.01 、0.1、1 及 10 μg/ml 的培养基内 24 h 。以 关系，以期为隐睾的防治提供借鉴。 鬼笔环肽标记法示 DES 作用前后细胞的形态学改变； CCK-8 法检测其增殖能力的变化；荧光定量 PCR 法检测 1 材料与方法 RXFP2 基因相对表达量的差异。 1.1 材料 结果 人类高位和低位隐睾睾丸引带细胞大部分为成纤维 1.1.1 标本来源 人类睾丸引带组织来源于上海 细胞样，其中低位组的细胞可自发融合成多核肌管样细胞。 市儿童医院泌尿外科的隐睾患儿，患儿术前均明确 诊断为隐睾，未伴发其他泌尿生殖系统畸形，且未 高浓度 DES （10 μg/ml）可抑制人类高、低位隐睾的睾丸引 带细胞的增殖、改变细胞的光镜特征和微丝骨架，但是其对 接受内分泌治疗及其他促进睾丸下降的治疗。根据 两组细胞的影响没有统计学差异。高浓度 DES 上调两组细 麻醉后未降睾丸的位置分为 2 组，麻醉下未降睾 胞 RXFP2 的表达水平。 丸的位置位于内环口以上的腹腔型隐睾为高位组， 出内环口但未出外环口的为低位组。本研究已通过 结论 人类高、低位隐睾的睾丸引带细胞具有不同的形态特 医院伦理委员会的批准（编号：2016R009-F01 ）， 征；高浓度外源性雌激素可改变高位和低位隐睾的睾丸引带 标本采集已征得患儿家长的知情同意。 细胞骨架、抑制细胞的增殖活力并上调人类引带 RXFP2 基 1.1.2 实验材料 DMEM 基础培养基、青链霉 因的表达。 素、L-谷氨酰