血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定—综合实验　.pptVIP

生物化学综合实验血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定 ;实验目的;血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定;蛋白质分离纯化与鉴定;血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定;一、盐析法粗分离血清γ-球蛋白;盐析法分离血清球蛋白;具体操作;二、葡聚糖凝胶柱层析脱盐 ;凝胶柱层析脱盐;目的与要求;凝胶层析原理：;凝胶层析法原理;分子筛层析;葡聚糖凝胶（Sephadex);▲ Sephadex G-50的准备 ▲ 装柱（15~20cm）;▲ 加样与洗脱;注意事项： 1 . 凝胶柱的制备质量决定分离效果的好坏 。 2. 加样分离时，滴速越慢，分离效果越好。;三、DEAE－纤维素离子交换层析 ;离子交换层析的基本原理;离子交换层析的基本原理;蛋白质的电离示意图 ;DEAE－纤维素离子交换层析纯化γ－球蛋白;操 作;四、γ－球蛋白纯化液的浓缩 ;五、γ－球蛋白鉴定 ; 血清蛋白质乙酸纤维素薄膜电泳;目的要求;原理;醋酸纤维素薄膜电泳??定 ;醋酸纤维素薄膜电泳;操作步骤：;;按泳动快慢顺序分为：清蛋白、α1、α2、β、γ—球蛋白。;注意事项： 1 、区分电泳槽正负极。 2 、点样处放在负极端，保持膜水平。;试剂材料;仪器;注意事项 ;思考题 ;谢 谢！