猴免疫缺陷病毒斑点酶免疫法检疫技术规范-检验检疫标准管理信息系统.PDF

SN XXXX-2012 行业标准《猴免疫缺陷病毒斑点酶免疫法检疫技术规范》 编制说明 1 任务来源 根据国家认监委 2010 年下达的标准编写任务 (计划编号：2010B211k) ，由广西出入境 检验检疫局主持中华人民共和国国家出入境检验检疫行业标准《猴免疫缺陷病毒斑点酶免 疫法检疫技术规范》的编制起草工作。 2 编制本标准的目的和意义 猴免疫缺陷病毒(SIV)属反转录病毒科慢病毒亚科，主要感染对象是猕猴和食蟹猴，病 毒主要侵犯和破坏免疫细胞，使机体细胞免疫功能受损，引起免疫系统综合症最终并发机 会性感染而死亡，死亡率 90% 以上[1]。SIV 和 HIV 同科同属，SIV 同 HIV 在基因大小和 组成上基本相同，有直接证据显示 HIV-2 由 SIV 而来，而 HIV-1 和 SIVcpz 之间的同源性 达到 80%[2]。SIV 变异感染人存在较大的可能性，被认为是人类巨大的潜在威协。该类传 染病通过性接触、母婴、血液传播，潜伏期长，潜伏期内不表现临床症状，不易察觉，但 期间有较强的传染力。我国灵长类实验动物以圈养、笼养方式为主，动物密度较大，使此 类传染病传播更加迅速。 非人灵长类实验动物即实验猴与人类在生理上十分接近，其遗传物质的 75%—98.5%与 人类具有同源性，是建立病毒等传染性疾病模型、神经性疾病模型、心血管疾病模型、肿 瘤模型、生殖生理研究、新药研究的最佳实验动物之一[3]。国内外医学实验中常用的实验 猴有恒河猴和食蟹猴两种，这两个品种也是中国目前人工驯养繁育灵长类动物的主要品种。 经过多年的引种繁育，我国食蟹猴的种群不断扩大，出口量占据了世界贸易量的半壁江山， 成为山区人民脱贫致富的一个重要资源。我国原生猴类资源丰富，主要集中在我国的南方 地区包括云南、广东、广西、四川、海南等。我国每年科学研究需要的灵长类动物总数在 3000 至 5000 只之间。国内商品化猴主要是以出口为主，大部分销往日本、美国和欧洲等 发达国家，美国一年的需求量已达到 9 万只，日本、韩国、欧盟需总求量已达到 12 万只。 对出口猴的检测要求非常高，每只猴从出生到养成出口，要逐只经过多次检测才能放行， 检测项目包括细菌、病毒、真菌、寄生虫等 10 多个项目。灵长类实验动物被广泛用于人类 医学研究，SIV 病毒都能破坏免疫系统，干扰实验结果，所以 SIV 病毒是实验猴必须严格 排除的病原。此外，我国为 SIV 非疫区，如果不慎引入该病毒并在我国内流行，不仅会严 重破坏我国境内野生和养殖猴群的健康，对我国实验动物国际声誉也是巨大的打击，被列 为我国与美国、欧盟等国家双边协议中检疫项目。国际上对 SPF 级猴的定义主要是指动物 体内不含猴 B 病毒（simian B virus，BV ），猴免疫缺陷病毒（simian immunodeficiency virus， ，猴Ｔ淋巴细胞性病毒（simian T-lymphotropic virus，STLV），猴反转录病毒（simian SIV） 1 retrovirus ，SRV）等几种特定病毒的猴。目前我国实验猴饲养、检疫还达不到 SPF 级标准， 主要以价值较低的普通级实验猴的标准进行出口。 目前国际上对SIV 的检测方法主要有：酶联免疫吸附法（ELISA ），斑点酶免疫法（DIA ）， 免疫荧光法（IFA ）等，目前国家标准《GB/T 14926.62-2001 实验动物 猴免疫缺陷病毒检 测方法》中规定的 ELISA 的法和IFA 法[4]，ELISA 法需要酶标仪等高级仪器设备。IFA 法 不仅需要荧光显微镜等昂贵的仪器设备，而且需要细胞培养，用细胞分离培养病毒，再用 荧光抗体染色，在荧光显微镜下观察结果，对人员技术水平要求很高，不适于实际工作中 大样品量的检疫，一般只用于对初筛结果的鉴定或用于科学研究。斑点酶免疫法（DIA ） 是一种简便、快速、敏感性和特异性良好的检测技术，并且在多种疾病的诊断、免疫监测 上广泛使用。斑点酶免疫（DIA ）检测方法是用硝酸纤维素膜（NC ）作载体，吸附被检抗 原，依据斑点颜色的有无作出判定，比较客观，操作简便，且材料用