Epidot酶联免疫斑点检测方法应用于结核诊断的初步-江苏大学杂志社.PDF

第２２卷第５期 江 苏 大 学 学 报（医学 版） Ｖｏｌ．２２ Ｎｏ．５ 　 ２０１２年９月 　 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉａｎｇｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＭｅｄｉｃｉｎｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｓｅｐｔ．２０１２ 　 　 　 　 　 　 Ｅｐｉｄｏｔ酶联免疫斑点检测方法应用于结核诊断的初步评价 １ １ ２ １ ３ 石利民 ，王燕 ，崔红莲 ，许文炯 ，史秋磊 ， 乔梦凯１ １ ３ １ ，雍玮 ，孙美艺 ，丁洁 （１．南京市疾病预防控制中心微生物检验科，江苏 南京 ２１０００３；２．中国科学院微生物研究所分子病毒和分子免疫室，北京 １００１０１；３．北京表源生物技术公司研发部，北京 １００１０１） ［摘要］　目的：初步评价自行研发的结核分枝杆菌抗原特异性 干扰素酶联免疫斑点（ＥｐｉｄｏｔＥＬＩＳＰＯＴ）检测方 γ 法应用于结核病诊断的价值。方法：应用自行研发的ＥｐｉｄｏｔＥＬＩＳＰＯＴ检测方法及进口ＴＳＰＯＴ．ＴＢ试剂盒，检测６０ 份结核病例和７５份健康人群的外周血结核特异性 干扰素释放水平［斑点形成细胞（ｓｐｏｔｆｏｒｍｉｎｇｃｅｌｌｓ，ＳＦＣｓ）］。 γ 结果：ＥＬＩＳＰＯＴ方法与ＴＳＰＯＴ．ＴＢ检测方法对结核感染人群中的敏感性分别为８１．６７％、９０．００％，特异度分别为 ９４．６７％、９４．６７％，ＥｐｉｄｏｔＥＬＩＳＰＯＴ的敏感度与ＴＳＰＯＴ．ＴＢ比较（２ ２ χ ＝１．３１３，Ｐ＝０．２５２），特异性比较（ ＝０．０００， χ Ｐ＝１．０００），差异均无统计学意义。分别用上述两种方法检测肺结核痰阳组和痰阴组形成的ＳＦＣｓ，组间差异均无 统计学意义。结论：自行研发的结核分枝杆菌抗原特异性 干扰素酶联免疫斑点技术的灵敏度和特异性与ＴＳＰＯＴ． γ ＴＢ检测方法类似，可用于结核感染的辅助诊断。 ［关键词］　结核；酶联免疫斑点实验；ＴＳＰＯＴ；ＥｐｉｄｏｔＥＬＩＳＰＯＴ ０５－０４４４－０４ ［中图分类号］　Ｒ４４６．６１　［文献标志码］　Ａ　　［文章编号］　１６７１－７７８３（２０１２） 　　人体感染结核分枝杆菌后产生一系列体液免疫 特异性［３］。且有研究认为，重组蛋白的表位聚集程 和细胞免疫变化。人体初次感染结核菌后使 Ｔ淋 ［４］ ＋ 度相对较低 ，重组蛋白刺激物检测 ＣＤ８Ｔ细胞 巴细胞致敏，转化为记忆Ｔ淋巴细胞。当人体再次 介导的免疫反应能力有限［５］。因此，我们选择特异 接触结核分枝杆菌后，会迅速产生效应 Ｔ淋巴细 性多肽表位而不用全长蛋白或重叠多肽进行诊断， 胞，产生多种细胞因子发挥免疫学效应。酶联免疫 希望能提高特异性和反应性。且我们自行筛选出２ 斑点检测法（ｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｐｏｔａｓｓａｙ，ＥＬＩＳ 株抗 干扰素的单克隆抗体株用于试剂盒，极大降