艾滋病实验室检测技术进展照PPT.ppt

艾滋病实验室检测进展山东省疾病预防控制中心苏生利2015年10月9日日照;一、检测进展;HIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等 ： 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根据特殊需要进行的体检等。 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV，包括献血员筛查和原料血浆筛查。 以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般人群。;感染机制 ;第一检测点，仅pool PCR阳性，p24抗原、四代ELISA、三代ELISA均阴性，召回时感染22天，三、四代ELISA阳性，确证试验结果不确定，感染30天时确证试验阳性。;（一）样本;1、全血样本;最好使血液达到试管的填充线处 确保保持正确的血液:抗凝剂比例 +/- 10% 填充量的差异是可接受的 当血液与EDTA-Na2抗凝剂的比例为1∶4以上时不影响.;;样本混匀;样本标记;样本标记;CD4送检问题-放冰块？;送检单;样本送检流程;2、血浆;2014年10月收到丙肝检测样本;3、血清;4、唾液;5、尿液;6、干血斑;干血斑样本采集在HIV检测中的应用评估;（二）检测技术-ELISA法;初筛：高敏感性=真阳性率=a/a+c； 复核：高特异性=真阴性率=d/b+d ;三代试剂 ↓阳性-Ab 三、四代试剂 阴性 阳性 发报告 WB ;2、快速法;2014年10月15日某市发现1例;示例;快速检测注意问题;3、化学发光法同时检测抗体和抗原;正常值参考的意义及灰色区域的存在 ;在二位点夹心ELISA中，在剂量反应曲线的高剂量区段，线性走向不是呈平台状无限后延，而是向下弯曲状，似一只钩子或一把镰刀（HOOK），这种现象称之为HOOK效应。 ;化学发光检测使窗口期由43.6天缩短为38.3天，虽然只缩短了12.2%，但却将残余风险降低了46.4%。;化学发光全自动检测;试剂评估（2007年）;4、确证实验;示例;HIV抗体确证检测数据;HIV快速确证试剂;5、尿液检测; MSM NGO小组 检测人员 很兴奋 很高兴 影响考核指标怎麽办？ 安全方便 多了个办法 不知道是谁干嘛做？ 愿意接受 安全可行 错了谁承担责任？ 准吗？ 可靠吗？ 增加工作有何好处？ 多少钱？ 多少钱？ 可靠吗？ 哪里可以做？ 可带去干预场所吗？价格是多少？ 看结果方便吗？ 担心采别人尿 不可能每天检测 什麽时候能用？ 何时可以用？ 质控如何做？ ;6、可区分抗原抗体检测（快速检测试剂-四代）;四代HIV快检试剂;酶联荧光分析法(ELFA);7、 HIV-1新近感染检测;A ;;新发感染的快速检测;8、CD4+T淋巴细胞检测;当其数量减少至200/μl时，即进入艾滋病期。 当其数量少于350/μl时，应结合病毒载量的测定情况确定开始治疗的时机。 抗病毒治疗8周后，CD4 T淋巴细胞数量升高50/μl以上提示治疗有效，反之则视为无效。 当其数量减少至500/μl左右时，即可开始出现机会感染或其它与免疫缺陷相关的症状；;艾滋病CD4细胞绝对计数——微球法及体积法;流式细胞仪;POCT技术应用：CD4细胞检测;质控品现状和希望;流式细胞仪检测质控图;正常值;项目;不同仪器、试剂与靶值间的偏差;全国CD4+T淋巴细胞PT结果 ;2014年国家疾控CD4+T淋巴细胞计数检测能力验证成绩;9、病毒载量测定方法;NASBA; Alere q 分子诊断平台;我国内VQA设备分布情况;EasyQ;送检单;HIV-1病毒载量主要检测技术;在HIV/AIDS中进行病毒载量检测的意义;规范拟修改模式;海力特科技，服务精准医疗;10、检测外包服务的探索;实验室在艾滋病防治中的作用;*;*;*;三、质量控制; 一个有效运行的质量管理体系，通常可以用两个标志来加以衡量： （1）凡影响检测报告质量的各种因素都能使其处于受控状态，以减少和消除质量问题的产生； （2）一旦出现质量问题，应能迅速反馈、及时研究，得出纠正和预防措施，防止问题的再度发生。 ;能力验证;实验室间比对;能力验证与实验室比对的区别;实验室质量控制的目的;实验室质量控制步骤;质控品浓度的选择;问题;ELISA和PA对强阳性样品的滴度测定;统计质量控制方法;质控图;即刻法质控;即刻法; 位移：连续几次（3?5次）外部对照S/CO值都落在均值的一侧则称为位移，提示实验条件发生了较大的变化。 位移的原因：使用新批号的试剂、实验员的更换、孵育温度的改变、仪器 ( 移液器 ) 故障等。;*;;;;连续10个测量点出现在中心线两侧的C区中;失控原因的分析;四、存在问题及建议