高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量 卫燕茹　中国刑事警察学院　110035 一、文献综述 复方对乙酰氨基酚的概述：复方对乙酰氨基酚是对乙酰氨基酚、异丙基安替比林和咖啡因的复方制剂， 主要用于治疗头痛、牙痛、月经痛、神经痛、风湿痛及感冒引起的发热等。异丙基安替比林的极性弱，与对乙酰氨基酚和咖啡因的极性相差很大，且这3组分的紫外吸收特征及溶解度也有较大差异, 因此建立同时测定这3 组分血药浓度的色谱方法存在较大困难，目前尚未见相关报道。 二、实验部分 1.仪器与试剂 (1)仪器。日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪，配UV检测器，N-2000双通道色谱工作站，BS 224 S型电子天平。 （2)试剂。对乙酰氨基酚标准品，咖啡因对照品，异丙安替比林标准品；复方对乙酰氨基酚片II；甲醇。 2.溶液的配制 (1)标准储备液的配制。分别精密量取对乙酰氨基酚标准品（约25mg）、咖啡因标准品（约10mg）、异丙安替比林标准品（约15mg）置于50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水（70∶30）溶解并稀释到刻度。其中对乙酰氨基酚的浓度约为0.5mg/ml，咖啡因的浓度约为0.2mg/ml，异丙安替比林的浓度约为0.3mg/ml。 (2)对照液的制备。精密量取对乙酰氨基酚储备液10ml，咖啡因储备液5ml、异丙安替比林储备液10ml，并分别置于50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水（70∶30）稀释至刻度，使其浓度分别约为0.1mg/ml、0.02mg/ml、0.06mg/ml，作为对照液。 (3)标准溶液的配制。分别精密移取三组分的储备液，置于25ml容量瓶中，加混合溶剂稀释至刻度，配成五种不同浓度的标准溶液。 (4)供试品溶液的制备。取20片复方对乙酰氨基酚片，精密称定（平均片重0.6539g），充分研细，精密量取适量（约相当于对乙酰氨基酚250mg）置50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水（70∶30）30ml，超声提取15min，加混合溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置50ml容量瓶中，加混合溶剂稀释至刻度，作为供试液。 　 结果表明：对乙酰氨基酚、咖啡因、异丙安替比林的出峰时间分别为2.765min、3.290min、12.990min；对乙酰氨基酚、咖啡因、异丙安替比林的分离度分别为1.92、1.92、7.28。 4.线性关系试验 精密移取各标准液依次经0.45微孔滤膜过滤，各进样20ul，以浓度对峰面积作线性回归。结果表明：对乙酰氨基酚在浓度为0.02008-0.1004mg/ml范围内线性良好，回归方程为Y=98.681x+0.0145，r=0.9990。异丙安替比林在浓度为0.013-0.066mg/ml范围内线性良好，回归方程为Y=241.29x+0.1578，r=0.9996。咖啡因在浓度为0.004-0.021mg/mi范围内线性良好，回归方程为Y=332.14x+0.2912，r=0.9995. 5.稳定性试验 将供试品溶液分别放置0h、1h、2h、4h、6h、8h和24h，进样20mu;l，测定三组分峰面积。结果表明，峰面积的RSD为0.23%，对乙酰氨基酚在24小时内稳定。峰面积的RSD为0.56%，异丙安替比林在24小时内稳定。峰面积的RSD为0.25%，咖啡因在24小时内稳定。 6.样品含量测定 取复方对乙酰氨基酚供试液，供试液经0.45微孔滤膜过滤，进样20 mu;l，重复进样三次，记录色谱图。按外标法以峰面积计算三组分含量（如表十七）。 三、讨论 1.色谱条件的选择 在寻找最佳流动相条件的过程中发现，当使用15cm长的色谱柱，流动相中甲醇比例较高时，对乙酰氨基酚与咖啡因的色谱峰相重叠，且异丙安替比林的色谱峰拖尾严重。当流动相中加入0.025%三乙胺时，仍然有拖尾问题，当三乙胺按照0.05%、0.1%的浓度升高时异丙安替比林的拖尾因子减小甚至消失，但是色谱峰高却增大，较为异常。考虑到三组分的酸碱性，流动相又改用为甲醇——磷酸盐水溶液，调节PH5-6，发现异丙安替比林的拖尾现象仍然很严重。当改用柱长为20cm的色谱柱后，在保护柱子的前提下先使用甲醇——水组成的流动相，结果发现异丙安替比林的拖尾问题明显改善，在甲醇——水（53∶47）的条件下对乙酰氨基酚、咖啡因两者的分离度大于1.5，三组分在15min中内