高密度脂蛋白胆固醇试剂对总胆汁酸测定的干扰分析.docVIP

精品论文 参考文献 高密度脂蛋白胆固醇试剂对总胆汁酸测定的干扰分析 潘刚熙 岑照弘 　　 (广西柳州市柳铁中心医院检验科 545007) 　　【摘要】目的 探讨全自动生化分析过程中HDL-C试剂对总胆汁酸测定的干扰。方法 用罗氏P800生化分析系统分别进行各组测定：不同程序清洗试剂针后同时测定HDL-C和TBA（实验组）与单独测定TBA（对照组），各实验组分别与对照组比较TBA结果差异。结果 同时测定HDL-C和TBA，TBA结果（44.02plusmn;1.510 mmol/L）明显高于单独测定TBA结果（4.05plusmn;0.688 mmol/L），两组比较P﹤0.05，差异有统计学意义；加强清洗试剂针1后同时测定HDL-C和TBA，TBA结果（12.71plusmn;1.7888 mmol/L）有明显下降，但与对照组比较，差异依然存在。结论 HDL-C试剂1对TBA测定有严重干扰，加强试剂针清洗未能完全消除干扰。 　　【关键词】高密度脂蛋白胆固醇 总胆汁酸 试剂针 　　【中???分类号】R446 【文献标识码】A 循环酶法测定总胆汁酸已普遍被应用于全自动生化分析仪，该方法具有高效、灵敏度高等优点，但在日常样品检测时发现，总胆汁酸时常出现假阳性结果，多个生化项目同时测定时TBA增高，单独测定TBA时结果正常，追踪发现高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）试剂对总胆汁酸测定有干扰。为具体研究HDL-C试剂对总胆汁酸测定结果的干扰，本实验采用新鲜血清同时测定HDL-C和TBA与单独测定TBA的比较，以了解HDL-C试剂对TBA测定的干扰原因。 　　1 资料与方法 　　1.1仪器与试剂 　　罗氏P800生化分析系统，双模块，TBA和HDL-C测定在同一模块，测定顺序为HDL-Crarr;TBA；TBA循环酶法体液双试剂，广州科方生物技术有限公司生产，批号：131120； HDL-C酶比色法体液双试剂，批号：679020-01，酸性洗液，批号:672354-01，罗氏诊断产品（上海）有限公司产品；碱性洗液（NaOH：1.0mol/L，自配）；新鲜正常血清。 　　1.2实验方法 　　(1)用新鲜血清单独测定TBA 20次，取TBA平均值为实验对照。 　　(2)设置仪器程序在完成HDL-C测定后用碱性洗液清洗比色杯，用新鲜血清同时测定HDL-C和TBA 20次，取TBA平均值。 　　(3)设置仪器程序，在加入HDL-C试剂1后用碱性洗液(D1)250mu;l加强清洗试剂针1，再吸取TBA试剂1，然后重复上述(2)步骤。 　　(4)设置仪器程序，在加入HDL-C试剂2后用碱性洗液(D1)250mu;l加强清洗试剂针2，再吸取TBA试剂2，然后重复上述(2)步骤。 　　(5)设置仪器程序，在加入HDL-C试剂1后用酸性洗液(D2)250mu;l加强清洗试剂针1，再吸取TBA试剂1，然后重复上述(2)步骤。 　　1.3统计分析 　　数据采用SPSS19.0软件进行分析，计量资料以-xplusmn;s表示，组间比较采用t检验，以P﹤0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1单独测定TBA均值为4.05plusmn;0.688mmol/L. 　　2.2同时测定HDL-C和TBA，TBA均值为44.02plusmn;1.5109mmol/L, 与对照组比较P﹤0.05，差异有统计学意义。 　　2.3设定不同程序加强清洗试剂针后测定HDL-C和TBA，TBA结果与对照组比较P值见表1。 　　表1 不同程序清洗试剂针后HDL-C试剂对TBA测定的影响 　　3 讨论 　　全自动生化分析仪的试剂加样结构是，所有项目试剂1、试剂2各使用同一根试剂针吸取试剂，使用同一根搅拌棒，而不同项目间试剂针仅用去离子水常规清洗一次试剂针和搅拌棒，前一个测试项目的试剂可通过试剂针和搅拌棒带到后一个测试中，造成分析项目间交叉污染[1-2]。环酶法测定TBA，样本中微量的胆汁酸在多次酶循环的过程中被放大，提高了测定的灵敏度，但微小的携带污染也在酶循环中被放大，使测定干扰相应增加。未设加强试剂针清洗，同时测定HDL-C和TBA， TBA结果明显高于对照组，P﹤0.05，两组比较差异有统计学意义，说明HDL-C试剂对TBA测定有明显干扰。 　　表1结果表明，设置加强清洗试剂针1后，HDL-C试剂对TBA测定干扰有较大改善，而设置加强清洗试剂针2后，对消除干扰无意义，(2)组和(4)组结果比较Pgt;0.05，差异无统计学意义，说明干扰TBA测定的携带污染主要来自HDL-C试剂1。有文献报道，试剂中加速终点反应的辅助成分胆酸盐可以干扰TBA的测定，但胆酸盐在多数