门诊乙肝患者和经拉米夫定治疗后乙肝患者基因分型和HBV P区耐药突变检测研究.docVIP

精品论文 参考文献 门诊乙肝患者和经拉米夫定治疗后乙肝患者基因分型和HBV P区耐药突变检测研究 卢红梅 　　（辽宁省丹东市传染病医院 118002） 　　【摘要】目的：分析门诊乙肝患者和经拉米夫定治疗后乙肝患者在基因分型、HBV P区耐药突变方面的区别。方法：选取120例乙肝患者作为研究对象，其中60例有过拉米夫定治疗史，纳入A组，60例未接受过拉米夫定治疗，纳入B组，对两组患者的HBVP区耐药突点、HBV分型进行检测、比较。结果：两组患者的HBV基因分型（B型、C型、D型、其他型）比较，差异均不具有统计学意义，Pgt;0.05；A组中，有26例的突变株存在于拉米夫定位点，占43.3%，B组有6例的突变株存在于拉米夫定位点，占10.0%，组间比较，差异有统计学意义（Plt;0.05）。结论：接受过拉米夫定治疗的乙肝患者，多存在拉米夫定耐药株，未接受过治疗的乙肝患者也需实施耐药检测，以便为临床诊断、治疗提供指导依据。 　　【关键词】HBVP区 耐药突变点 拉米夫定 乙肝 　　【中图分类号】R512.6+2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）01-0156-02 　　乙肝是临床常见病、多发病，全球范围内的乙肝感染者数量高达3.5亿，每年约有100万人因肝功能衰竭、肝硬化、肝癌死亡[1]。为探讨门诊乙肝患者和经拉米夫定治疗后乙肝患者在基因分型、HBVP区耐药突变方面的区别，本研究分别对未接受治疗和接受拉米夫定治疗的乙肝患者进行了HBVP区耐药突点、HBV分型，现报道如下。 　　1 一般资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选取我院在2011年10月～2013年10月收治的120例乙肝患者作为研究对象，所有患者均符合《病毒性肝炎防治指南》中的乙肝诊断标准，其中男性58例、女性62例，年龄在17～66岁之间，平均（37.3plusmn;2.3）岁。其中60例为接受过拉米夫定治疗的住院患者，纳入A组，60例为未接受过拉米夫定治疗的门诊患者，纳入B组。两组患者的其他类型肝炎病毒（庚型、戊型、丙型、甲型）检测，均为阴性。两组患者在年龄、性别方面比较，Pgt;0.05，差异无统计学意义，有可比性。 　　1.2 方法 　　采集两组患者的静脉血（2ml）后，以干燥玻璃管保存，离心5分钟（1500r/min），采集上层清夜备用。取100mu;l血清样本，加入PEG6000（50mu;l、20%），混匀后离心10分钟，吸出上清液（150mu;l），保留沉淀，然后加入裂解液（25mu;l），将沉淀调离管底，吹洗5次。将沉淀打散后，温育（100℃）10分钟，再离心10分钟，转移上清液，获得DNA纯化溶液。采用荧光定量 PCR技术、DNA测序技术进行 HBV分型和HBV P区耐药突变点检。 　　1.3 统计学方法 　　应用SPSS18.0统计学软件对研究数据进行处理、分析，相关数据比较采用卡方检验，Plt;0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　两组患者的基因分型比较，详见表1。由表1可知，两组患者的HBV基因分型（B型、C型、D型、其他型）比较，差异均不具有统计学意义，Pgt;0.05。 　　表1 两组患者的基因分型比较[n,%] 　　基因型 A组（n=60） B组（n=60） 　　B 13（21.7） 15（25.0） 　　C 42（70.0） 40（66.7） 　　D 5（8.3） 5（8.3） 　　其他 0（0.0） 0（0.0） 　　两组患者的HBVP区耐药突变点比较，详见表2。从表2可知，两组患者主要存在阿德福韦酯、拉米夫定耐药株。A组中，有26例的突变株存在于拉米夫定位点，占43.3%，B组有6例的突变株存在于拉米夫定位点，占10.0%，组间比较，差异有统计学意义（Plt;0.05）；A组有4例的突变株存在于阿德福韦酯位点，占6.7%，B组有3例（5.0%），组间比较无显著性差异（Pgt;0.05）；A组其他突变耐药株3例（5.0%），B组10例（16.7%），组间比较差异有统计学意义（Plt;0.05）。 　　表2 两组患者的HBVP区耐药突变点比较 　　 　　 　　3 讨论 　　耐药性是乙肝病毒拮抗抗病毒药物发生的基因改变，病毒耐药性的产生会严重影响治疗效果，增加治疗难度[2]。据实验研究显示[3]，发生对拉米夫定耐药的rtM204V、rtL180M双变异或者rtM204I变异HBV病毒，对替比夫定的抗病毒应答率会降低1000倍以上。 　　本次研究结果显示，A组与B组的H