青钱柳悬浮培养细胞多糖抑制胰淀粉酶作用研究.docVIP

JIANGXI AGRICULTURAL UNIVERSITY 本 科 毕 业 论 文（设 计） 题目：青钱柳悬浮培养细胞多糖抑制胰淀粉酶作用研究 学 院： 食品科学与工程学院 姓 名： 学 号： 专 业： 食品科学与工程 班 级： 食工1202 指导教师： 职 称： 副教授 二0 一六 年 五 月 目录 摘要 I Abstract II 1 实验材料与方法 1 1.1 实验仪器与材料 1 1.1.1 实验仪器 1 1.1.2 实验材料 1 1.2 实验方法 2 1.2.1 试剂的配制 2 1.2.2 青钱柳悬浮细胞多糖的动力学研究 2 1.2.2.1 葡萄糖的标准曲线的绘制 2 1.2.2.2 胰淀粉酶活性测定方法 3 1.2.2.3 抑制剂下的胰淀粉酶的反应 3 1.2.3 青钱柳悬浮细胞多糖的荧光猝灭研究 3 1.2.3.1 激发波长的确定 3 1.2.3.2 荧光猝灭原理 3 2 实验结果与分析 4 2.1 青钱柳悬浮细胞多糖动力学研究 4 2.1.1 葡萄糖浓度标准曲线和胰淀粉酶的活性 4 2.1.2 青钱柳悬浮细胞培养多糖抑制剂下胰淀粉酶的吸光值 5 2.2 青钱柳悬浮细胞荧光猝灭结果与分析 7 2.2.1 荧光猝灭的λex 7 2.2.2 青钱柳悬浮细胞多糖的荧光猝灭 7 3 结论 10 参考文献 10 致谢 13 摘要 本文研究了青钱柳悬浮培养细胞多糖抑制胰淀粉酶作用，旨在为青钱柳降血糖作用提供理论基础。先采用动力学方法，通过葡萄糖标准曲线及体外反应模型的建立，随着抑制剂浓度的增大，吸光值减小,青钱柳悬浮细胞多糖Ic50=700mg/ml；然后采用荧光猝灭研究方法，作出的荧光光谱图Stern-Volmer方程分析，青钱柳悬浮细胞多糖的kq大于双分子扩散性猝灭常数值，且伴随着青钱柳悬浮细胞多糖浓度的增加，荧光的强度降低且荧光发射波长（λem）发生蓝移。青钱柳悬浮培养细胞多糖具有抑制胰淀粉酶的抑制能力，其抑制机理是动-静态相联合。 关键词：阿卡波糖；青钱柳悬浮细胞培养多糖；胰淀粉酶；酶促反应；荧光猝灭 Abstract In this paper, the effect of Polysaccharide from the suspension culture cell of the green willow was studied in order to provide the theoretical basis for the hypoglycemic effect. The kinetic method, through the establishment of standard curve of glucose and in vitro reaction model, with increasing concentration of the inhibitor, light absorption value decreased, suspension cells in Cyclocarya paliurus polysaccharide Ic50=700mg/ml; then by fluorescence quenching method, make the fluorescence spectra analysis of stern Volmer equation, suspension cells in Cyclocarya paliurus polysaccharide KQ greater than bimolecular quenching constant numerical diffusion and with suspended cells in Cyclocarya paliurus polysaccharide concentration increased, reduce the intensity of the fluorescence and fluorescence emission wavelength (lambda EM) blue shift. The polysaccharide fro