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限制酶切割及电泳的题目 1.现有一长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子,用限制性核酸内切酶酶切后,进行凝胶电泳,使降解产物分开。用酶H单独酶切,结果如图l。用酶B单独酶切,结果如图2。用酶H和酶B同时酶切,结果如图3。该DNA分子的结构及其酶切图谱是?(???? ) 2.在DNA 测序工作中,需要将某些限制性内切酶的限制位点在 DNA上定位,使其成为 DNA 分子中的物理参照点。这项工作叫做“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验:用限制酶 HindⅢ,BamHⅠ和二者的混合物分别降解一个 4kb(1kb即1千个碱基对)大小的线性DNA 分子,降解产物分别进行凝胶电泳,在电场的作用下,降解产物分开,如下图所示。? ?据此构建这两种限制性内切酶在该DNA分子上的“限制酶图谱”如乙图,请判断正确的标示是(??? ) A.? 2.8???????? B.? Hind Ⅲ????? ? C.?? 0.3????? D.??? BamHⅠ 3.现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp,用KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子,用EcoRI、KpnI同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是的(???) 4.基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ,限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是(??? ) A.质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割 B.质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割 C.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 D.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 5.细菌蛋白质在极端环境条件下可通过肽链之间的二硫键维持稳定。已知不同的多肽产物可因分子量不同而以电泳方式分离。下列左图是一个分析细菌蛋白的电泳结果图,“-”代表没加还原剂,“+”代表加有还原剂,还原剂可打断二硫键,“M”代表已知分子量的蛋白质,右侧数字代表蛋白质或多肽的相对分子量。根据左侧结果,下列哪个图案最能代表该细菌原本的多肽结构(注意:“一”代表二硫键)(??? ) 6、已知正常的β-珠蛋白基因(以βA表示)经MstⅡ限制酶切割后可得到长度为1.15 kb和0.2 kb的两个片段(其中0.2 kb的片段通常无法检测到),异常的β珠蛋白基因(以βS表示)由于突变恰好在MstⅡ限制酶切割点上,因而失去了该酶切位点,经MstⅡ限制酶处理后只能形成一个1.35 kb的DNA片段,如图1;现用MstⅡ限制酶对编号为1、2、3的三份样品进行处理,并进行DNA电泳,结果如图2,则1、2、3号样品的基因型分别是(以βA、βS表示相关的基因) A.βSβS、βAβS、βAβA B.βAβA、βAβS、βSβS C.βAβS、βSβS、βAβA D.βAβS、βAβA、βSβS 7、下表为几种限制酶识别的序列和切割的位点。如图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是[??? ] A.1 为EcoRⅠ,2为BamHⅠ,3为BamHⅠ,4为PstⅠ B.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为BamHⅠ,4为PstⅠ C.1 为PstⅠ,2为EcoRⅠ,3为EcoRⅠ,4为BamHⅠ D.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为PstⅠ,4为EcoRⅠ 8.Mst Ⅱ是一种限制性内切酶,它总是在CCTGAGG的碱基序列中切断DNA。图中显示了用Mst Ⅱ处理后的正常β-血红蛋白基因片段。镰刀型细胞贫血症的根本原因是β-血红蛋白基因突变。下列有关叙述中,错误的是( ) A.在起初的正常β-血红蛋白基因中有3个CCTGAGG序列 B.若β-血红蛋白基因某一处CCTGAGG突变为CCTCCTG,则用Mst Ⅱ处理该基因后产生3个DNA片段 C.将Mst Ⅱ酶用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断,若产生3个DNA片段,则β-血红蛋白基因正常 D.将Mst Ⅱ酶用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断,若产生4个DNA片段,则β-血红蛋白基因正常 9、下面是4种限制酶所识别的DNA分子序列和剪切位点图(↓表示剪切点、切出的断面为黏性末端)。请指出下列哪组表达正确[??? ] 限制酶1:—↓GATC—??? ???限制酶2:—CATG↓—限制酶3:—G↓GATCC—??? 限制酶4:—CCGC
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