论文开题报告-成人隐匿性自身免疫性糖尿病多因子联合检测与临床应用PPT.pptx

;目录;;2;LADA的诊断目前国内外比较公认的诊断标准，国际糖尿病免疫学会（IDS）对LADA的诊断建议基于3条标准：（1）成年人起病；（2）诊断糖尿病后至少半年不依赖胰岛素治疗；（3）胰岛自身抗体阳性。所以，胰岛自身抗体是目前筛查和诊断LADA的主要免疫学手段。常见的胰岛自身抗体包括： GADA(谷氨酸脱羧酶抗体) IA-2A（蛋白酪氨酸磷酸酶2自身抗体） IAA（胰岛素自身抗体） ZnT8A（锌转运体-8自身抗体） ICA(胰岛细胞抗体)： CHPA（羧基肽酶H）：;液体芯片原理;液体芯片优点在于： 1．高通量：仅需微量样本(10μm )，最多 100个指标。 2．高速度：最快可达 10 000测试／h。 3．低成本：试剂用量少，能有效降低临床应用的试剂成本。 4．灵敏度高：检测低限可达 pg／ml。 5．重复性好 ：每个指标有 5 000个反应单元 ，分析 100 次取平均值。 6．线性范围广 ：检测范围达 6个数量级。 7．操作简便 ：无需洗涤：减少误差来源。 液体芯片作为必威体育精装版一代的多指标并行检测技术平台，具 有检测速度快、结果准确性高、操作简便、功能强大 、成本低 廉等诸多优点，可广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分 析、受体和配体识别分析等研究 ，在临床诊断、生物医学 (包 括基因组学、蛋白质组学)研究等领域都有着广泛的应用 ，代 表着生命科学基础研究和医学诊断技术的发展方向。; 本课题研究的目的：应用液体芯片技术，联合定量测定糖尿病患者血清GADA、IAA、ICA，IA-2A，ZnT8A,CHPA并对其临床应用进行评价。 意义及应用价值：本研究采用液体芯片技术，通过实验建立糖尿病患者血清GADA+IAA+ICA+IA-2A+ZnT8A+CHPA的联合检测系统，可在2-3小时内联合测定1-2μl血清中的多抗体水平，该方法操作简单、快速、灵敏度高、重复性好、检测范围广，克服传统免疫学方法一次只能检测一个指标的缺点，有望成为LADA早期诊断、干预治疗及疗效评价的有力手段。 ;国内外研究现状及发展趋势： 张曼华、张丽等探讨GADA、ICA、IAA在LADA中的表达和临床意义中指出联合检测GADA、ICA可从T2DM病人中及早发现LADA。周智广、潘玲玲等对四种自身抗体联合筛查成人隐匿性自身免疫糖尿病的策略研究中指出联合检测GADA、IA-2A、IAA、ZnT8A可提高LADA的阳性诊断率。以上研究中抗体检测法均为比较繁琐的传统免疫学方法，敏感性低，一次只能检测一项指标。 锌离子转运蛋白8抗体（ZnT8A）、羟基肽酶H抗体（CPHA）是必威体育精装版发现的两种胰岛素自身抗体，Wenzlau JM研究发现联合检测ZnT8A、GADA、IA-2A、IAA和ICA，可以将诊断的敏感性提高至98%。Yang L等研究指出联合检测GADA和CPHA对于诊断LADA的效率是最佳的。 目前已有多篇利用液体芯片技术进行自身免疫研究的研究报道。其中一个试验同时检测了5种可提取性核自身抗原， 与公认的单一试验ELISA法相比具有良好的相关性。另一个小组研究了37例干燥综合症患者血清中的抗核抗原(ANAS)和可提取性核抗原。他们分别在84％和76％的患者血清中检测到干燥综合症A抗原和B抗原(SSA和SSB)的抗体。 目前国内外尚无用液体芯片进行LADA的诊断的相关报道，本研究拟建立LADA多抗体联合检测的液体芯片，包括ZnT8A、GADA、IA-2A、IAA、ICA和CPHA六种自身抗体的联合检测，并探讨其临床价值。 ;;研究方法;研究方法;预期成果及创新;;解决问题初步设想：应进行全面的稳定性试验，以确保结合了配合基的蛋白质在产品保存期内都可与固相???质稳定结合．在分析验证阶段，必须确保多路复用分析的结果与相应的单路分析结果相当。稳定性试验最好在标称的保存期末进行，这时最容易发现同题。只有所有分析物的多路和单路分析结果都近乎相同时。研究人员才能认定小球装置的混合并未产生相互干扰．多路复用测定中潜在的相互作用数是微球芯片中测定次数的一个函数。随着芯片复杂程度的增加，各分析之间可能发生的不良作用也快速增加。生产前必须解决这一干扰问题．;选题可行性及保障条件基础分析;;