第4章微生物生长PPT.ppt

第 4 章 微生物的生长; ;1.微生物的生长 一个微生物细胞在合适的外界环境条件下，不断地吸收营养物质，并按其自身的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其重量、体积、密度或浓度作指标来衡量。 微生物的生长表现在微生物的个体生长与群体生长两个水平上。 ;2.微生物个体生长 表现为个体质量和体积的增加。 3.微生物群体生长 以微生物细胞的数量或微生物群体细胞物质量的增加作为生长的指标。 个体生长→个体繁殖→群体生长 群体生长＝个体生长＋个体繁殖 ;因而要了解微生物的生长规律，就要了解微生物的个体生长和群体生长两个方面。;一、测微生物总数 1、计数器直接计数;2、电子计数器计数（略） 3、染色涂片计数 将已知体积的待测材料均匀涂布在载玻片的已知面积内，染色后显微镜下计数。一般1cm2 均匀涂片0.01ml样品。选择几个至十几个视野计数细胞数量。借助镜台测微尺测直径可计算出视野的直径： 每ml总数=视野平均菌数×1 cm2/视野面积×100×稀释倍数; 涂片染色法;提问：数了125个小格中有90个细菌，样品中的细菌浓度是多少？ (90个÷125) * 400 / 0.1ml =2880个/ml 适用范围：测定个体较大的细菌或原生动物 细菌个体若太小、过多，由于每一小格中细菌层层叠加，相互遮挡，难以准确计数。;5、比例计数法 将菌液与等体积血液混合后涂片，计算细菌数与红细胞比例。根据比例来计数; 比浊计数法;以生物量为指标测定微生物的生长;5.比浊法;（二） 测定活菌数;无菌水; ;一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为宜。; 稀释液体计数法; ;The most probable number method（液体稀释法）;比例计数法;;膜过滤培养法;以数量变化对微生物生长情况进行测定;统计－查表－计算 ;（三） 计算生长量：测细菌重量; 二、研究微生物生长的方法 微生物生长分个体生长和群体生长。培养方法有分批培养和连续培养。 ;停滞期;;1、停滞期（迟滞期或适应期）（lag phase）: 将细菌接种到某一培养基后，细菌并不立即繁殖而是经过一段适应期才能生长繁殖。调整适应表现在合成多种酶、完善体内的酶系统及其他细胞成分。 ; 影响因素： （1）接种量。接种量大，停滞期可缩短 （2）菌龄。菌种年轻，对数生长期接种，停滞期可能很短甚至不明显; 2、对数期（指数期）log phase 细菌生长速度达到最大，数量以几何级数增加。 ;世代时间的计算： ;;影响因素： （1）温度。在适温范围内，每增加10℃，生长速度提高1倍；;（2）营养；营养越丰富，代时越短 （3）氧气。好氧菌若能供给充足的氧，可能使对数期延长。;对数期的实践意义 ① 是代谢、生理研究的良好材料 ② 是增殖噬菌体的最适宿主菌龄 ③ 是发酵生产中用作“种子”的最佳种龄 ④ G+染色鉴定时采用此期微生物 ; 3、稳定期（stationary phase） 由于营养消耗，供应不足及代谢产物的积累，这时一部分菌死亡，细菌进入稳定期。;特点： （1）菌数达到最高峰； （2）活菌数达到动态平衡； （3）生长速率为零； （4）开始积累贮存物质 ; 4、衰亡期 decline phase 由于营养缺乏和代谢产物积累造成自身中毒，细胞生长受阻，时间和菌数对数呈反比，生长曲线直线下降。 特点： （1）生长速率为负值，活菌数减少； （2）细菌发生自溶现象autolysis （3）代谢产物大量积累； （4）形态多变，出现畸形或衰退形。 ;4.3.2 连续培养 原理：如果在培养器中不断补充新鲜营养物质并及时不断地以同样速度排出培养物，理论上讲，对数生长期可以无限延长。 ; 恒浊连续培养可以不断提供具有一定生理状态的细胞，可以得到以最高生长速率进行生长的培养物，在微生物工业上运用此法可得到大量菌体及相应的代谢产物如乳酸、乙醇。 ;2、恒化连续培养 维持进水中的营养成分恒定，从而保持细菌的恒定生长速率称恒化连续培养，也称恒组成连续培养。 恒化连续培养基中，某种必须的营养物