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砀山梨黑斑病分子检测技术研究-中国农学通报
中国农学通报 2016,32(4): 150-154 Chinese Agricultural Science Bulletin 砀山梨黑斑病分子检测技术研究 1 1 2 2 2 1 李云飞 ，陈雪娇 ，张爱芳 ，杨 雪 ，陈 雨 ，姚 剑 1 2 （安徽出入境检验检疫局，合肥230022 ；安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所，合肥230031 ） 摘 要：黑斑病是砀山梨上最重要的病害之一，建立一套砀山梨黑斑病的分子检测技术对该病害的早期 及时防治及口岸检验检疫具有重要的意义。本研究通过分析比较砀山梨黑斑病菌与其他19种不同真 菌的ITS 序列，设计了1对特异性引物，能够从该病菌中特异性地扩增出1条398 bp 的条带，而其他测试 真菌中不能扩增出该条带。在灵敏度检测中，该菌的基因组DNA 检出限为10 pg/μL ，同时在发病的砀 山梨果实组织样品和接种梨黑斑病菌的梨果实组织样品中检测出梨黑斑病菌。因此，可以将该对引物 用于梨黑斑病早期诊断及病菌的PCR 检测，为指导果农及时进行药剂防治提供有效的技术支撑。 关键词：砀山梨黑斑病；梨黑斑病菌；ITS 序列；分子检测；植物检疫 中图分类号：S412 文献标志码：A 论文编号：cas MolecularDetectionofAlternariaalternata CausingBlackSpotofDangshanPear 1 1 2 2 2 1 LiYunfei,ChenXuejiao,ZhangAifang,YangXue,ChenYu,YaoJian 1 (AnhuiEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau,Hefei230022; 2InstituteofPlantProtectionandAro-ProductsSafety,AnhuiAcademyofAgriculturalSciences,Hefei230031) Abstract: Black spot is one of the most severe pear diseases. Establishing a PCR detection method is importantforearlydiagnosisandportplantquarantine.Inthisstudy,theITSsequenceofAlternariaalternata andother 19differentfungiwereanalyzedandcompared,andapairofspecificprimersweredesignedwhich couldspecificallyamplifya 398bpfragmentfromAlternariaalternata,butnotfromothertestedfungi.Inthe sensitivitytest,thedetectionlimitofthebacteriagenomicDNAwere 10 pg/μL, Alternariaalternata was detected in both diseased pear fruit with symptoms of black spot or inoculated pear fruit by Alternaria alternata.Therefore,thispairo
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