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Ca^2螯合剂对三尖杉酯碱you导HL60细胞凋亡的影
维普资讯 21 安嵌医科太学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui1998Dect336() 4·27· ④ ca+螯合剂对三尖杉酯碱诱导 HL60细胞凋亡的影响 √ 夏瑞祥 林果为 励雁峰。 钱耕荪。 R．73j、7 摘要 目的 了解细胞内ca 在三尖杉酯碱诱导HL60细 ca 在细胞凋亡中的作用。 ／ 弓一6／ 胞凋亡中的作用 。方法 以三尖杉酯碱单独或与 ca抖螯合 剂EGTA共同处理HL60细胞后，用藏式细胞仪和DNA凝 1 材料与方法 胶电泳检测细胞凋亡 的发生．结果 ca暑+螯合剂EGTA抑 1．1 细胞 HL60细胞从中国科学院上海细胞学 制了细胞凋亡。结论 三尖杉脂碱诱导的HL60细胞凋亡需 要ca“参与． 研究所引进，接种于含 150ml·L 灭活小牛血清 主囊词 细胞凋亡；乙二醇类；螯合剂I三尖杉碱赢映}肿 的RPMI1640培养藏中，在 37C、0．05CO2培箱内 瘤细胞，培养的 L6o’ 囱血菇· l 培养，2～3天传代 1次。 1．2 主要试剂 HT为屏山制药厂产品，EGTA为 中国图书资料分囊法分类号 R73．351}R979．19 Sigma公司产品。药物先配成母液贮于4℃，使用前 以细胞培养液稀释成所需浓度 “。 细胞凋I~(apoptosis)是细胞在受到某种信号的 1．3 细胞凋亡诱导 收集指数生长期细胞，调整细 触发后主动参与并遵循一定程序的死亡过程，并且 胞数到每毫升 1×10，分别将 HT0．2nag·L + 受细胞 内外多种因素的影响。ca 在细胞内传递信 EGTA 10 mol·L 或 HT 0．2nag ·L 处理 息，与细胞凋亡 的关系一直受到关注，但各家对 HL60细胞，收集处理后不同时限细胞。 ca 在细胞凋亡中的作用报道不一0 为此，我们 1．4 流式细胞仪检测 细胞用柠檬酸缓冲液固定， 将能使细胞内ca。缺乏的ca 螯合剂乙二醇(双氨 胰酶消化，碘化丙锭染色，测定5000个细胞，作细 基乙基)醚四乙酸(EGTA)与化疗药物三尖杉酯碱 胞周期分析。 (HT)共 同处理 白血病细胞系HL60，观察EGTA对 1．s DNA凝胶电泳 按常规酚氯仿抽提DNA，定 HT诱导HL60细胞凋亡的影响，并探讨了细胞 内 量。2 琼酯糖电泳，溴乙锭染色 1998-06—16收稿．1998-08—11修回 2 结果 作者单位：上海医科大学华山医院血蒗科 200040(‘现在安徽医 2．1 单独以HT诱导HL60细胞时，于 2h经流式 科大学第一附属医院血藏科．台肥 230022) 0上海市肿瘤研究所 200032 细胞仪检测和DNA凝胶 电泳，可见到细
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