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实验一 非特异性反应
[实验内容]: 补体的溶血作用(操作) 大小吞噬细胞的吞噬作用(示教) 人体免疫系统 一、固有免疫的组成 ( 一)组织屏障及其作用 1、皮肤黏膜及其附属成分的屏障作用 ▲ 物理屏障 ▲ 化学屏障 ▲ 微生物屏障 2、血脑屏障 3、血胎屏障 补体的溶血作用 概念 (complement) 存在于正常人或动物血清及组织液中一组与免疫相关具有酶活性和自我调节作用的球蛋白。因它们能协助和补充特异性抗体介导的溶菌、溶血作用,故称为补体。它是由30种成分组成的复杂系统,部分成分遇热不稳定(56℃加热30分钟即可灭活)。 三条激活途径的比较:(page 55) 本次实验涉及的原理 绵羊红细胞(SRBC)+SRBC溶血素——Ag-Ab(IC) 识别:与免疫复合物抗体(Ig)中补体结合位点结合后 其分子构象发生改变,致C1r及C1s被激活 活化:C4 、C2在激活C1的作用下分解产生C4b及C2a,两者组成C42a,它为C3转化酶——C3分解产生C3b,与C42结合形成C423(C5转化酶)——C5分解产生C5b 膜攻击复合物形成:C5b进一步与C6、C7、C8、C9作用后,最终产生C5b6789(即膜攻击复合物),使SRBC穿孔,发生溶血反应。 实验材料: 2%SRBC 1瓶(30ml)/列 SRBC溶血素 1支(2.5ml)/2组 补体 1支(2.5ml)/2组 盐水 1瓶(30ml)/列 试管 3根/组(做好标记) 吸管 **试管及吸管的拿捏方法 实验步骤 大小吞噬细胞 的比较 * * 实验一 非特异性免疫 屏障结构(如皮肤、粘膜 血脑屏障、胎盘屏障) 吞噬细胞 体液因素(如补体、溶菌酶、 乙型溶素等) 细胞免疫 体液免疫 非特异性 免疫 特异性 免疫 人体 免疫 (二)固有免疫细胞 吞噬细胞、NK细胞、 NK1.1+ T细胞??T细胞、B-1细胞 (详见p89 第九章) (三)固有免疫效应分子 补体、细胞因子、防御素、溶菌酶、乙型溶素 补体三条激活途径及共同末端效应全过程 膜攻击复合物(mebrane attack complex, MAC)结构示意图 膜攻击复合物电镜观测示意图 SRBC(Ag)+ 溶血素( Ab) Ag-Ab(IC) 识别: C1q 补体结合位点 活化:膜攻击复合体(MAC)形成 效应:溶血 原理 实验一 补体的溶血作用 豚鼠图 - 1.0 0.5 - 0.5 3 - 1.0 - 0.5 0.5 2 ? 0.5 0.5 0.5 0.5 1 结果 盐水 补体 SRBC溶血素 2%SRBC 管号 (如下图)加样 37℃水浴15-30分钟,观察结果 1号管中SRBC溶解,液体由混浊变为澄清\透明 **实验结束后吸管置废液缸,试管置铁蓝框 参与非特异性免疫 参与非特异及特异性免疫 ?功能 a. 胞体较小,边缘较整齐,胞内见深紫色的分叶核及淡红色的中性颗粒 b. 胞浆内见被吞噬的细菌团呈紫色 a. 胞体大、不规则,有伪足,边缘不整齐,胞内见不规则的大核 b. 胞浆内见吞噬的鸡红细胞呈椭圆形、淡紫红色且有核 形态及 镜下特征 血液中中性粒细胞 组织中巨噬细胞和单核细胞 细胞类型 小吞噬细胞 (neutrophile granulocyte) 大吞噬细胞(macrophage,monocyte) ?
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