第六章 抗体.pptVIP

孙教授科学版-2010-春 （三）铰链区（CH1和 CH2区之间）： 多脯氨酸残基， 可发生构象改变利于 1）Fab与抗原表位结合 2）CH2功能区的暴露 Antibody structure VH和VL：六个CDR(每个10~12aa）构成凹槽或口袋状结构结合抗原决定簇。可诱生抗独特型抗体 CH和CL：同种异体间存在个体差异，能诱发同种异型抗Ig抗体。 CH2/CH3（IgG/IgM）:补体结合位点,母体IgG借助CH2通过胎盘。 CH3/CH4：与Fc受体结合 2.IgG功能 1）主要抗感染抗体、参与自身免疫、超敏反应 2）新生儿抗感染免疫 3）激活补体(IgG3、1、2；IgG4） 4）调理作用、ADCC(IgG1/3) 5) 参与免疫损伤 特性：IgG1、IgG2、IgG4 的Fc可与葡萄球菌蛋白A（SPA）结合，纯化抗体 五、IgE （1）正常时含量极低（0.002%） （2）两类Fc受体—高亲和力受体：与I型超敏反应有关 低亲和力受体（FcεRⅡ)：主要分布于巨噬细胞、B细胞和嗜酸性粒细胞，与ADCC有关 高亲和力受体(FcεRⅠ)：肥大细胞和嗜碱性粒细胞，介导I型超敏反应 第三节 免疫球蛋白分子的Fc受体 Fab: 抗原识别单位；Fc效应单位 IgGFcR（Ig?R）： Fc?RⅠ(CD64)：主分布单核巨噬细胞，高亲和力受体 Fc?RⅡ(CD32)：分布广，较低（中等）亲和力的受体 Fc?RⅢ(CD16)：主分布NK、M? 及部分T细胞，低亲和力受体；介导ADCC和调理作用。 IgE FcR（Ig?R）： 1）Fc?RⅠ高亲和力受体，分布于肥大细胞和嗜碱性粒细胞。 2）Fc?RⅡ为低亲和力受体，主分布于B细胞和T细胞 IgAFcR（Ig?R）： Fc?R-CD89 ，为中等亲和力受体,主分布于单核巨噬细胞、中性粒细胞，。 第四节 抗体的生物学活性 第六节 抗体的制备 HAT筛选原理示意图 本章需要求 掌握：抗体概念；抗体结构；免疫球蛋白功能区；生物学功能 熟悉：免疫原性；各种抗体的特性 了解：人工抗体制备 名词：免疫球蛋白；抗体；CDR；单克隆抗体；基因工程抗体 7 IgM结构及其与抗原结合状态 分泌片和IgA 分泌 The disposition, interaction and biological properties of the Ig domains in IgG. (A) and (B) Elctron micropraph (*1000 000) of complexes formed on mixing the divalent DNP hapten with rabbit anti-DNP antibodies IgE结构 抗原抗体复合物激活C1图示 通常将抗体促进抗原被吞噬细胞吞噬以及增强吞噬细胞吞噬和杀伤能力的作用称为抗体的调理作用opsonization ADCC：效应/杀伤细胞（MO/MΦ、NK等）通过其表面Fc受体与被抗体包被的靶细胞相互作用，释放活性物质，裂解或杀伤靶细胞的生物学过程。 第五节 免疫球蛋白的免疫原性 一、同种型（isotype） 类、亚类、型、亚型，具有种特异性，存在于Ig的C区 二、同种异型（allotype） 具有个体特异性（同种内部），表现为Ig的C区的一个或数个aa不同 三、独特型（idiotype） 同一个体不同B细胞克隆所产生的Ab的V区特有的氨基酸序列和空间构型。 1.多克隆抗体(PcAb): 多数天然抗原具有多种抗原决定簇,感染机体后可刺激多个B细胞克隆发生免疫应答,产生多种相应抗体,这种由多个克隆细胞产生的多种抗体混合物,即为多克隆抗体. 2.单克隆抗体(McAb): 第二代抗体 由一个始祖细胞分化、增殖所产生的遗传性状完全相同的细胞群,称为细胞克隆. 由一个细胞克隆产生的只作用于某一Ag决定簇的均一抗体,称为单克隆抗体. 杂交瘤细胞：B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，既具有脾细胞产生抗体的功能，又有癌细胞的无限增殖特性。 单克隆抗体的制备流程 四氢叶酸 二氢叶酸 二氢叶酸还原酶 dTTP － dATP、dCTP 胸苷（T) 氨基喋呤(A) 胸苷激酶（tk，正常细胞表达） ＋ 次黄嘌呤(H) 补救途径 tk-/-细胞株 脾细胞 tk+杂交瘤细胞 脾细胞 tk-/-细胞株 HAT培 养 基 不能增殖而死亡 可存活，表达抗体，但不能长期传代 表达抗体，无限增殖 3.基因工程抗体(GeAb): 由基因重组技术制备的抗体,称为基因工程抗体. 1）人-鼠嵌