仪器分析实验课件PPT-分子荧光分析法.pdfVIP

苯环类物质的荧光光谱分析及定量测定 一、方法原理 二、分子荧光分光光度计 分子荧光分析法 三、实验技术 四、方法与应用 五、实验内容 荧光分析法基本原理 荧光的激发光谱和发射光谱 如果固定荧光的发射波长（即测定波长），而不断改变 激发光（即入射光）的波长，并记录相应的荧光强度，所得 到的荧光强度对激发波长的谱图称为荧光的激发光谱 （简称 激发光谱）。 如果使激发光的波长和强度保持不变，而不断改变荧光的 测定波长（即发射波长）并记录相应的荧光强度，所得到的 荧光强度对发射波长的谱图则为荧光的发射光谱(简称发射光 谱)。 分子荧光分光光度法特点 1. 灵敏度高 −7 一般紫外−可见分光光度法的灵敏度约为10 g/mL 。而荧光法的灵敏 −10 −12 度可达到10 g/mL~10 g/mL 。 2. 标准曲线的线性范围宽 3. 选择性比吸收光谱法好 4. 应用范围不如吸收光谱法广泛 荧 光LS-55 分 光 光 度 计 荧 光RF-5301PC 分 光 光 度 计 荧光分光光度计基本组成 测量荧光的仪器主要由四个部分组成：激发光源、样品 池、双单色器系统、检测器。工作原理 特殊点：有两个单色器，光源与检测器通常成直角。 基本流程如图： 单色器 ：选择激发光波长 的第一单色器和选择发射 光(测量)波长的第二单色 器； 光源 ：灯和高压汞灯，染 料激光器(可见与紫外区) 检测器：光电倍增管。 实验技术 一、样品的制备 二、测定条件的选择 A 、激发波长和发射波长的选择 B、狭缝宽度的选择 三、反应条件的选择 A 、溶液酸度的选择 B、显色剂的浓度 C、温度的影响 分子荧光分光光度法的应用 荧光分析法具有灵敏度高、选择性好，重现性好、方法 简捷以及取样量少等优点，使其越来越成为分析化学工作者 必需掌握的一种重要分析方法。另外仪器设备不复杂也是其 一大优点。 荧光分子法的应用主要集中在两个方面： 基于分子荧光光谱的定性分析以及基于荧光强度的定量分析 2+ 2+ + + Ca 、Mg 、K 、Na 等 A 、定性鉴定中的应用 近70种元素进行灵敏测 定，也可分析氮化物、氰 化物、硫化物以及氧、臭