薄荷烟对吸食大鼠影响的代谢组学研讨.pdfVIP

第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 P—H013 薄荷烟对吸食大鼠影响的代谢组学研究· 石先哲扩’，何智慧b，窦阿波a，张凤霞a，许国旺a 16023 a中国科学院大连化学物理研究所中科院分离分析化学重点实验室大连1 b湖南中烟工业有限责任公司技术中心长沙410007 台，利用该平台研究了薄荷烟对吸食大鼠动物模型整体代谢状态的影响。结果表明吸食混和烟和薄 荷烟都对大鼠的代谢产生改变，而且两类卷烟的影响也不一样。 关键词：液相色谱—线性离子阱．飞行时间质谱；代谢组学；薄荷烟 1前言 薄荷醇又名六氢百里酚，俗名薄荷脑，是植物中的萃取物，也可以人工合成。薄荷醇是美国食 品药品监督管理局批准使用的食品添加剂，也是烟草香料、牙膏香精、花露水等常用添加剂【l】。多 数卷烟中都含有少量薄荷醇，而薄荷烟是指薄荷醇含量达到烟草质量0．1％～1．O％的卷烟。近年来， 国外有学者提出卷烟中的薄荷醇可能导致更强的成瘾性，并可能引发更多的烟草相关疾病。针对这 一假说，国外学者开展了大量病理、生理、毒理学以及流行病学研究，但目前并没有得出一致性的 结论。代谢组学是近年来生命科学领域研究的一大热点。它通过研究生物体对环境等因素产生的代 谢物的质和量的动态变化，从整体角度评价生物体代谢状态的波动，从而更深刻地理解生命过程12J。 液相色谱．质谱(HPLC．MS)技术是代谢组学研究领域中普遍采用的样品分析技术之一，它具有灵敏 度高、普适性好、分辨率高、选择性高、可提供样品结构信息等优点。 在本文中，应用基于液相色谱．质谱联用的代谢组学方法研究了薄荷烟对吸食大鼠动物模型整体 代谢状态影响。 2实验部分 · 动物实验：60只SD大鼠随机分成三组：对照组、吸食混和烟组和吸食薄荷烟组，2个月后， 收集24小时尿样，．80℃保存。 内标的稀释液(199／mLproprand01)，混匀后0．22I，tm膜过滤。 150x2．0mm 液相色谱条件：采用岛津细粒径色谱柱(ODS id，2．29m)作为分析柱，柱温35C， 正离子扫描m／z100．1000。 3结果与讨论 的稳定性。结果表明该方法的重复性较好，满足要求。采用内标法消除分析过程中可能引进的系统 做内标。 大鼠尿样分析，在正离子模式下获得的典型全组分谱图见图l。通过峰对齐过程，在正离子模式下 获得了含8427个变量的峰表。虽然对照大鼠、吸食混和烟和吸食薄荷烟大鼠尿样的分离谱图显示出 ’湖南中烟工业公司科技项目“代谢组学方法研究薄荷醇卷烟”资助项目 “通讯联系人，石先哲，Email：shixianzhe@dicp．ac．cn 1073 第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 不同的指纹特征，但要从近万个测出变量中提取出代表代谢状态变化的生物标记物，必须借助化学 计量学的帮助。这一方法包括数据的内标校正、去除缺失值和构建多变量模型等过程。所有变量信 息经内标校正后进行数据分析。采用PLS．DA方法对对照大鼠、吸食混和烟和吸食薄荷烟大鼠进行 分类。从图2中得分图(score)可以看出，在正离子模式下，三组大鼠能得到较好的分离。这表明 吸食混和烟和薄荷烟都对大鼠的代谢产生改变，而且两类卷烟的影响也不一样。图2给出了PLS-DA 分析的载荷图(10ading)，得到了一批潜在生物标志物，目前正在鉴定中。 Rdealion弧㈣ 图lHPLC．IT-TOFMS分析大鼠尿样典型谱图 1074 第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 、：I鞭巍 卅瞄}1)^k●缸