实验三离体蛙心灌流.pptVIP

实验三 电刺激和化学因素对心脏活动的影响 一、实验目的 1.学习离体蛙心灌流方法。 2.观察在心脏活动周期内给予刺激所引起的期前收缩和代偿间歇。 3.观察Na+、K+、Ca2+、Adr（肾上腺素）、Ach（乙酰胆碱）对心脏活动的影响，理解内环境理化因素相对恒定对维持心脏正常活动的重要性。 1、心肌的生理特性： 2、两栖类动物的心起搏点： 3、心肌兴奋性的周期性变化： 二、实验原理 自律性、兴奋性、传导性、收缩性。 静脉窦。 有效不应期； 相对不应期； 超常期。 有效不应期 = 收缩期 + 舒张早期 期前收缩：给予心室肌一次有效刺激，产生一次正常节律以外的收缩反应，该收缩先于下一次正常窦房结兴奋引起的收缩。 1、心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境（离子浓度、pH等），内环境的变化直接影响到心脏的正常节律性活动。 2、因此可用人工灌流的方法，观察灌流液成分的改变对离体心脏活动的影响。 无Ca2+任氏液； 任氏液（1% KCl；1% CaCl2；2% CaCl2)。 二、实验原理 1、神经调节：在体心脏受交感神经和迷走神经的双重支配。 交感神经末梢释放NE（去甲肾上腺素），使心肌收缩力加强，传导速度加快，心率加快，即产生正性变时、变力、变传导作用； 迷走神经末梢释放Ach（乙酰胆碱），使心肌收缩力减弱，心肌传导速度减慢，心率减慢，即产生负性变时、变力、变传导作用 。 2、体液调节 0.01% Adr（肾上腺素） 0.01% Ach（乙酰胆碱） 心脏活动调节 四、手术操作 1.取蟾蜍，破坏脑和脊髓、暴露心脏。 1 2 3 4 （腹面） （背面） （两栖类动物心脏解剖结构示意图） 2. 蛙心插管（操作难点） 1 2 3 4 蛙心插管步骤小结： 1、在主动脉下穿线，备结扎用； 2、在主动脉根部剪一斜切口； 3、插管装任氏液，食指堵住上口； 5、将插管转向插入心室（插入后有血液进入插管），将丝线结扎固定在蛙心套管上。 4、将插管顺着主动脉方向插入动脉圆锥； （腹面） 3.游离蛙心 1、轻提起蛙心插管，剪断动静脉(勿损伤静脉窦），将心脏离体，观察插管内液面高度是否随着心脏的收缩和舒张而变化？ 2、用滴管吸净插管内余血，加入新鲜任氏液，反复换洗数次，直至液体完全澄清。 3、始终保持灌流液面高度恒定（1-2cm）。 五、仪器连接 1 2 3 4 将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉，再将蛙心夹上的系线与张力传感器相连。 不可夹得过多，以免因夹破心室而漏液 勿使灌流液滴到传感器上 仪器连接注意事项 六、软件操作 1.描记正常蛙心收缩曲线 　　 　　　曲线疏密：代表心跳频率。 　　　曲线的规律性：代表心室的节律性。 　　　曲线的顶点水平：代表心室收缩的程度。 　　　曲线的基线：代表心室舒张的程度。 七、实验项目观察与记录 2.期前收缩和代偿间歇 3.改变灌流液成分对心脏活动的影响 } 对心脏活动的影响 （心率、收缩力度、基线水平） 无钙任氏液； 任氏液内分别添加: ( 1% KCl； 1% CaCl2； 0.01% Ach； 0.01% Adr； 2% CaCl2； ） （1）吸出插管内全部任氏液，换入无钙任氏液，观察心缩曲线变化，待效应明显后，吸出灌流液，用新鲜任氏液换洗3次，直至心缩曲线恢复正常。 （2）加1-2滴1% KCl于新换入的任氏液中，观察心缩曲线的变化。待出现效应后，用新鲜任氏液换洗3次至曲线恢复正常。 （3）加入1-2滴1% CaCl2于新换入的任氏液中，观察心缩曲线的变化。待出现效应后，用新鲜任氏液换洗3次至曲线恢复正常。 （4）加入1-2滴0.01% Adr于任氏液中，待效应出现后，用任氏液换洗至曲线恢复正常。 （5）加入1-2滴0.01%Ach于任氏液中，待效应出现 后，用任氏液换洗至曲线恢复正常。 血液中的肾上腺素和去甲肾上腺素主要由肾上腺髓质所分泌，两者对心和血管的作用，既有共性，又有特殊性，这是因为它们与心肌和血管平滑肌细胞膜上不同的肾上腺素能受体，结合能力不同所致。 　　肾上腺素与心肌细胞膜上相应受体结合后，使心率增快，心肌收缩力增强，心输出量增多，临床常作为强心急救药。 去甲肾上腺素也能显著地增强心肌收缩力，使心率增快，心输出量增多；使除冠状动脉以外的小动脉强烈收缩，引起外周阻力明显增大而血压升高，故临床常作为升压药应用。可是，在完整机体给予静脉注射去甲肾上腺素后，通常会出现心率减慢。这是由于去甲肾上腺素能使外周阻力明显增大而升高血压的这一效应，通过压力感受器反射而使心率减慢，从而掩盖了去甲肾上腺素对心的直接作用之故。 * *