比较临床生化检验中改良终点法和原终点法的应用效果.docVIP

精品论文 参考文献 比较临床生化检验中改良终点法和原终点法的应用效果 黄俊生(河南省濮阳市妇幼保健院检验科 457000) 　　【摘要】目的：比较临床生化检验中改良终点法和原终点法的应用效果。方法：运用改良终点法与原终点法进行实例检测，评价两种检测方法的相关性、精密度严格依据NCCLS 制定的评价方案。结果：两种检测方法检验结果差异不大（P＞0.05）；改良终点法在批内CV和总CV测定中，正常浓度下高于原终点法，异常浓度下低于原终点法，差异显著（P＜0.05）。结论：临床生化检验中改良终点法的精密度均比原终点法优，极大节约了成本，值得推广。 　　【关键词】改良终点法 原终点法 生化检验 　　【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）20-0064-02 　　在临床生化检验中，终点法是实验室最常用的一种检测方法，它计算待测物浓度的方法为混合样品和试剂，反应一定时间后达到平衡点（终点）。一点终点法和两点终点法是终点法的两个主要类型[1]，依据方法学理论，我们在对程序进行测定的过程中将改良一点终点法设计了出来，同时以氧化酶法对血清葡萄糖进行测定为例，依据NCCLS制定的评价方案，比较分析了改良终点法和原终点法的相关性，并评价了二者的精密度，现报告如下。 　　1.材料和方法 　　 1.1检验材料 　　所用仪器为MODULAR DPP 全自动生化分析仪（德国罗氏），在测定时保证仪器的工作状态良好；所用试剂为Lot No.522 UN/2标准血清（英国RANDOX公司）和Level2-780UN,Level 3-597UE质控血清（英国RANDOX公司），所用试剂盒为液体单试剂型（氧化酶法）葡萄糖测定试剂盒（德国罗氏，Lot；所用标本为血清标本，这些标本均没有溶血、脂浊等，1h内完成所有检测；葡萄糖标准液的精确规格[2.00 g/dl(111.00 mmol/L)]。 　　1.2检验方法 　　1.2.1相关性比较 　　定标时运用RANDOX标准血清，室内质控在每次测定中必不可少。原终点法的测光点、波长、样品量、试剂量R1、反应方向、单点定标如表1所示。依据NCCLS 制定的评价方案，每天将10份临床标本收集起来，这些标本的葡萄糖浓度有高、中、低三个类型，按1-10号顺序分别运用改良终点法与原终点法测定，然后按10-1的顺序分别运用改良终点法与原终点法测定，取两次测量结果的均值。进行10d的连续测量，标本数为100份，运用配对t检验及直线回归分析两种方法所得结果。 　　表1 改良终点法与原终点法的程序参数设置（葡萄糖测定） 　　1.2.2精密度 在对精密度进行测算时严格依据美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS） 制定的评价方案，将2份质控血清选取出来，其中一份具有正常的浓度，另一份具有异常的浓度，对其进行复溶，复溶时严格依据说明书，然后将其在塑料管中分装，每管250mu;l，在-20℃的温度下将封闭管口的两种液体冷冻保存，每次使用前和使用后分别让其融化到室温和丢弃，每次使用过程中双份测定每份浓度的质控血清，试验做到定时定点，每天2批，上下午各1次，共进行20d的测定，同时进行室内质控，计算出批内的不精密度，然后计算出总不精密度。 　　 1.3统计学分析 本次所有调查数据均采用软件SPSS20.0进行统计分析，其各项临床指标分别采用均数或百分比表示，用t或卡方检验，当Plt;0.05时表示其差异具有统计学意义。 　　2.结果 　　2.1相关性 回归方程为y=1.0112x－0.0381，r=0.9992（n=100），改良终点法与原终点法测定结果之间的差异不显著（P＞0.05）。 　　2.2精密度 正常浓度下改良终点法测定的批内CV和总CV均明显比原终点法高（Plt;0.05），异常浓度下改良终点法测定的批内CV和总CV均明显比原终点法低（Plt;0.05）。具体见表2。 　　表2 改良终点法与原终点法测定的精密度结果比较 　　3. 讨论 　　近年来，在生化分析中，终点法得到了日益广泛的应用，总蛋白双缩脲法、葡萄糖氧化酶法等是临床生化检验中的常用实验，极具代表性[2]。通常情况下，临床手工操作完成终点法。我们在对终点法进行改良的过程中严格依据了其检测原理，即减半混合样品和试剂量，前提是样品和试剂的比例保持不变，在终点前（仪器测光前）将等量的水加入其中均匀稀释，然后对其吸光度进行测定。在将水加入第二试剂的情况下，在全自动生化分析仪上，我们可以使单试剂终点法和双试剂终点法相互转换；在第三试剂中注水的情况下，双试剂终点法和三试剂终点法也可以相互