感清糖浆HPLC特征指纹图谱研究.docVIP

精品论文 参考文献 感清糖浆HPLC特征指纹图谱研究 凯里学院，贵州 凯里556000；贵州百灵企业集团制药股份有限公司，55000 摘要 目的：建立感清糖浆的HPLC特征指纹图谱分析方法，为全面的质量评价提供依据。方法：采用HPLC法，色谱柱为Diamonsil C18柱（4.6mmtimes;250mm，5mu;m）；以乙腈-0.1%磷酸水溶液作为流动相，梯度洗脱：0~30min，10%~20%乙腈；30~50min，20%~25%乙腈；50~80min，25%~35%乙腈；80~120min，35%~85%乙腈；体积流量1.0mL/min；检测波长282nm；进样量10mu;l。结果：采用《中药色谱特征图谱相似度评价系统2012版》进行分析，建立了感清糖浆HPLC特征指纹图谱的共有模式，指认了芦丁、石吊兰素、金丝桃苷、没食子酸4个特征峰。结论：首次建立了感清糖浆的HPLC对照特征指纹图谱，该方法简单、快速，重复性好，对感清糖浆的整体质量提出了更高的要求，为质量控制和评价标准提供充分的依据。 关键词：感清糖浆；高效液相色谱法；特征指纹图谱；芦丁；石吊兰素；金丝桃苷；没食子酸 【中图分类号】R365【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)09-0365-02 应用色谱特征谱控制中药复方制剂的质量，是中药复方制剂走向国际的前提条件[1]。因此，本实验首次建立了感清糖浆的特征指纹图谱方法，初步确定共有峰的归属，保证临床用药的安全有效性。 1仪器与试药 Agilent Technologies 1200 series高效液相色谱仪；HS10260D型超声波清洗仪； YHG.600-BS-II型远红外鼓风干燥箱；RE-52A型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；色谱柱（AlltimaTMC18 、DiamonsilC18）；DiamonsilC18色谱柱（4.6mmtimes;250mm，5mu;m）。石吊兰素（批号：111555-200602，含量测定用）；没食子酸（批号：110831-200803，含量测定用）芦丁（批号：100080-200707，含量测定用）金丝桃苷（批号：111521-201205，含量测定用)。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱为Diamonsil C18色谱柱（4.6mmtimes;250mm，5mu;m）；流动相：乙睛-0.1%磷酸水，梯度洗脱，洗脱程序为0~30min，10%~20%乙腈；30~50min，20%~25%乙腈；50~80min，25%~35%乙腈；80~120min，35%~85%乙腈；检测波长282nm；流速1.0mL?min-1，进样量10mu;L；洗脱时间为120min。 2.2 对照品溶液的制备 取芦丁，没食子酸，石吊兰素，金丝桃苷各约0.2mg，精密称定，置5mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 2.3 供试品溶液的制备 精密量取感清糖浆10ml，加硅藻土5g，拌匀，在60℃烘干，放冷，研细，精密加入100mL甲醇，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50ml，蒸干，残渣加水25ml 使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次25ml，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.4 方法学考察 2.4.1 测定时间的确定 精密吸取感清糖浆供试品溶液10mu;l，注入高效液相色谱仪。，按“2.1”项下色谱条件进行测定，色谱峰显示，保留时间120min后，无色谱峰，故将时间确定120min。 2.4.2 精密度试验 取批品，按照“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进行测定，连续进样5次，记录特征图谱。将色谱数据导出*.cdf格式文件，并将数据导入国家药典委员会2012年颁布的《中药色谱特征图谱相似度评价系统A版》进行评价（下同），计算得该5次特征图谱的相似度高于0.99，各共有色谱峰相对保留时间的RSD均小于0.09%，相对峰面积的RSD均小于0.72%，说明仪器精密度良好。 2.4.3 稳定性试验 取同一批供试品溶液，分别在2h、4h、6h、8h、12h、24h、36h、48h进行测定，记录特征图谱。计算得48h内8次进样所得的特征图谱的相