病原性球菌鉴定-南华大学.pptVIP

病原性球菌鉴定 南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心 教学对象：高等医学院校卫生检验专业学生 实验课时：6学时 课程类型：专业实验课 课程要求：必修 每组人数：2人 实验目的 掌握葡萄球菌属的分离培养与鉴定方法 、菌落特点、菌体形态及染色性 掌握链球菌属的分离培养与鉴定方法 、菌落特点、菌体形态及染色性 实验器材和试剂 显微镜 恒温培养箱 菌种 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌葡萄球菌 超净工作台 一、葡萄球菌属的鉴定 形态观察 取金黄色葡葡球菌与表皮葡萄球菌做革兰氏染色后置显微镜下观察细菌染色性、大小、形态、排列 结果：可见革兰氏阳性葡萄状排列的球菌 菌落观察 取金黄色葡葡球菌与表皮葡萄球菌接种血平板，37oC培养18~24h，观察其菌落大小、形态、色素及溶血现象 一、葡萄球菌属的鉴定 生化反应 触酶试验 原理：葡萄球菌产生的触酶，能将对细菌有害的H2O2分解成无害的水和氧气 方法：用接种环挑取普通琼脂平板上的葡萄球菌，置于洁净玻片上，滴加3% H2O2溶液1-2滴，观察结果 结果：半分钟内产生大量气泡为阳性，不产生气泡为阴性 一、葡萄球菌属的鉴定 生化反应 血浆凝固酶试验 原理：金葡菌能产生血浆凝固酶，可使血浆中可溶性纤维蛋白变为不溶性纤维蛋白，附着于细菌表面，在玻片上形成凝块；游离型的血浆凝固酶则可使试管中血浆发生凝固 玻片法：取未稀释的新鲜兔血浆和生理盐水各1滴分别滴加于载玻片上，挑取待检葡萄球菌菌落少许，分别与生理盐水和血浆混合，立即观察结果，此法测结合型凝固酶。 试管法：取3支10×10mm试管，各加入0.5ml 1:4稀释的新鲜兔血浆，在其中1支试管中加3-5个待检菌落，充分研磨混匀，另2支试管中分别加凝固酶阳性株和阴性株作对照，37oC水浴3-4h，观察结果。此法用于测定游离型凝固酶。 一、葡萄球菌属的鉴定 生化反应 甘露醇发酵试验 原理：致病性葡萄球菌多能发酵甘露醇产酸，使培养基由紫色变为黄色。 方法：将三种葡萄球菌分别接种于甘露醇发酵管，35oC，24h观察结果：培养基呈混浊，由紫色变为黄色为阳性，仍为紫色者为阴性 二、链球菌属的鉴定 形态学观察 甲、乙、丙溶血链球菌分别做革兰氏染色，观察其形态与排列 菌落观察 链球菌在血琼脂平板上生长后出现灰白色、圆形凸起、表面光滑、边缘整齐的针尖大小的菌落，周围可出现不同的溶血情况； 甲链出现草绿色溶血环（α溶血，不完成溶血），乙链出现透明的溶血环（β溶血，完成溶血），丙链无溶血环 链球菌形态观察 β溶血现象 注意事项 对血浆凝固酶试验阴性的葡萄球菌，也可引起致病 如菌血症、尿路感染和心内膜炎 金黄色葡萄球菌引起的食物中毒，还需要作肠毒素测定 总目录 上页 退出 下页 返回 退出 总目录 下页 退出 葡萄球菌（革兰染色?1000） 葡萄球菌的普通平板菌落照片 金黄色葡萄球菌血平板菌落照片 宽大透明溶血环（β溶血）