临床微生物SOP-克雷伯菌属检验标准操作规程.docVIP

1. 概述 克雷伯菌属包括肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、鼻硬结克雷伯菌和鼻臭克雷伯菌4个种。临床以肺炎克雷伯菌最为常见。 2. 标本类型 血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3. 鉴定 3.1形态与染色 革兰阴性粗短杆菌。 3.2培养特性 在血琼脂平板上35℃培养18～24小时，呈灰白色、不溶血的菌落。在麦康凯琼脂平板上形成大而隆起、黏液样、易融合的、粉红色菌落，用接种环挑取呈丝状粘连。 3.3生化反应 氧化酶试验阴性，发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖等多种糖类，TSI为A/A，IMViC - - + + ，硝酸盐还原、脲酶和赖氨酸脱羧酶试验阳性，动力、H2S、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶试验均为阴性。 3.4鉴定要点 3.4.1菌属特征 琼脂平板上菌落较大、隆起、黏液样、用接种环挑取呈丝状粘连，发酵葡萄糖等多种糖类，IMViC - - + + ，脲酶和赖氨酸脱羧酶试验阳性，动力试验阴性。 3.4.2 克雷伯菌属的种间鉴别见下表 克雷伯菌属种间鉴别的关键性试验（阳性%） 菌名 吲哚 VP 枸橼酸盐 脲酶 赖氨酸 丙二酸盐 乳糖 肺炎克雷伯菌 0 98 98 95 98 93 98 产酸克雷伯菌 99 95 95 90 99 98 100 鼻硬结克雷伯菌 0 0 0 0 0 95 0 鼻臭克雷伯菌 0 0 30 10 40 3 30 3.5 操作步骤 3.5.1 氧化酶试验 参见《氧化酶试验标准操作规程》。 3.5.2 鉴定 从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反 进行细菌鉴定。 4. 药敏 参见《抗菌药物敏感试验标准操作规程》及CLSI必威体育精装版版本文件。 5.质量控制 见《质量管理程序》。 6. 检验结果解释与分析 6.16．检验结果解释与分析 肺炎克雷伯菌可产生ESBLs，据国内文献报道产酶率在30%以上，产酶株对青霉索、头孢菌素类及单酰胺类抗生素均产生耐药。如果检出产ESBLs肺炎克雷伯菌，即使体外药敏试验对青霉素类、头孢菌素类或氨曲南敏感，也应报告该菌对所有青霉素类、头孢菌素类或氨曲南耐药。但其对头霉素、部分加酶抑制剂的复合抗菌药和碳青霉烯类抗菌药敏感。 7．临床意义 肺炎克雷伯菌是人类呼吸道的常居菌，在人和动物肠道内也常见，是一种条件致病菌。在临床分离到的克雷伯菌属中，肺炎克雷伯菌占80%以上，是本属中最为常见的病原菌，可引起肺炎、脑膜炎、腹膜炎、泌尿系统感染、菌血症等疾病。 8. 鉴定流程 尿液、痰、血液等 麦康凯琼脂平板呈黏液样、粉红色菌落 氧化酶试验阴性 仪器鉴定或手工生化鉴定并做药敏试验 克雷伯菌属 参考文献 [1] 中国合格评定国家认可委员会．CNAS - GL23：2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南．2008 [2] 周庭银编著．临床微生物学诊断与图解．第二版．上海：上海科学技术出版社，2007 [3] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编．全国临床检验操作规程．第三版．南京：东南大学出版社，2006 [4] Murray PR. Manual O/F Clinical Microbilogy.9thed. Washington:ASM Press, 2007 [5] IS0 15189：2007医学实验室一质量和能力认可准则．2007 编写人签名 复审人签名 审批人签名 生效日期 姓 名：XX 编写日期:2011-05 姓 名：XXX 复审日期：2011-06 姓 名：XXX 批准日期：2011-06 2011-07 XXXX医院检验科 微生物实验室 克雷伯菌属检验标准 操作规程 编号：MYCH/ 版本：第1版 第0次修改 页数：第 1 页 共 3 页 克雷伯菌属检验标准操作规程