移植的检查.ppt

移植的检查 池溢信 钟思健 张璐璐 姚碧江 陈梦龙 contents 移植的概念 移植是指将一个体的细胞、组织或器官用手术或其他方法移植到自体或另一个体的某一部位。移植的细胞、组织或器官称为移植物，提供移植物的个体称为供者，而接受移植的个体称为受者。根据移植物来源及供、受者遗传背景的差异，将移植分为四种类型：①自体移植：是指把来自移植受者本身的组织移植到受者；②同种同基因移植：是指遗传结构完全相同或非常相似的个体（同卵孪生子或近交系动物）之间的移植；③同种异基因移植：是指同一动物种内遗传结构不同个体之间的移植；④异种移植：是指不同动物种个体之间的移植，如动物器官移植给人。 现代移植学科的发展已经可将多种细胞、组织或器官进行移植，输血是较早开展的细胞移植，肾移植是最早成功的器官移植。随着放射疗法、免疫抑制药物的应用和器官保存技术、植入技术的提高，肾、肝、肺、心脏和骨髓移植已成为很多病人组织器官功能衰竭末期唯一的根治性治疗手段。 受者与移植物之间的排斥反应是移植成功的主要障碍 ，在同种异基因移植或异种移植中，移植成功的关键取决于供、受者间组织相容性抗原是否一致或相近。 同种异体抗体检测 器官移植受者体内预存抗体，主要来自天然血型抗体。受者因多次妊娠、反复输血和接受血液制品，接受过异种或异体移植，或者某些细菌／病毒感染后由类属抗原诱生的抗HLA 抗体或其他针对组织细胞的抗体，尤其是与血管内皮细胞抗原结合的抗体，当这些预存的抗体进入移植器官后，与其血管内皮细胞的细胞膜抗原结合形成抗原抗体复合物，激活补体导致血管损伤，移植物受损。移植前筛选出这些抗体，防止超急排斥和急性排斥反应，提高移植物存活率具有重要的意义。 具体检测方法 1、补体依赖淋巴细胞毒试验: 是通过检测受者血清中是否存在有针对供体的补体依赖的淋巴细胞毒抗体，以此来确保同种异体移植不发生超急性或急性排斥 2、群体反应性抗体测定 是指群体反应性抗HLA-IgG抗体，是各种组织器官移植术前筛选致敏受者的重要指标，与移植排斥反应和存活率密切相关。 3. 流式细胞术交叉配型: 流式细胞术测定供者淋巴细胞反应性同种抗体，具有高度的灵敏性。其原理是：将受者血清与供者淋巴细胞共同孵育后，用荧光素标记的抗人IgG或IgM的单克隆抗体进行免疫荧光染色，在流式细胞仪分析荧光强度的强弱及阳性细胞百分率，从而判断受者血清中有无抗供者淋巴细胞的HLA抗体存在 HLA分型及其检查 器官移植成功的关键是选择适合的供受者，即ABO血型相符，HLA型别相同或相近。目前认为HLA-DR位点抗原是最重要的，HLA-DQ、DP在移植中亦有重要意义，其次是HLA-A、B抗原，HLA-C对移植过程意义较小。 检测方法 1、 血清学分型：使用标准的HLA分型抗体与受者的淋巴细胞混合，加入补体，抗体与HLA抗原特异结合后激活补体， 使淋巴细胞膜受损或裂解，然后用染料（台酚蓝或伊红）染色，通过在显微镜下计数死亡淋巴细胞的百分比判定结果。死亡细胞死亡百分率高为阳性，说明待检淋巴细胞的HLA型与标准HLA型一致；阴性时说明待检淋巴细胞的HLA型与标准分型抗体HLA不一致。血清学分型法主要用于检测HLA-A、B、C位点上的抗原。 2、混合淋巴细胞培养 ：将供者与受者的淋巴细胞混合在一起进行体外培养一定时间后，由于二者细胞表面HLA抗原不同，淋巴细胞通过识别对方HLA抗原而活化增殖并转化为淋巴母细胞，通过判定淋巴细胞转化情况，确定混合淋巴细胞反应的强弱，二者HLA差异越大，MLR越强，反之越弱。 移植器官的功能监测 移植器官的功能状态是衡量移植成功的关键指标。移植后要密切观察其功能指标，一方面可以了解移植器官的功能状态，另一方面可以预测移植排斥反应和调整药物用量。引起移植器官功能丧失的原因除了排斥反应，还有感染缺血和药物的毒性等。首先根据有无发热和移植物肿胀初步判断移植器官的功能，但这些变化都是非特异性的。移植器官的功能测定根据移植物不同而异，多需做大量的生化和血液学指标，如血常规检查判断有无感染，肾移植后的肾功能检查，肝移植后的肝功能、凝血功能等检查。某些辅助检查例如B型超声和彩色多普勒等对了解移植器官的形态、血管通畅性和血流量等也有一定的帮助 移植排斥反应监测 移植排斥反应的临床表现与其他原因如药物的器官毒性作用或病原微生物感染的临床表现非常相似，因此及早、准确地诊断移植排斥反应就显得格外重要。若能早期明确诊断排斥反应，通过适当的治疗有可能使排斥反应逆转或大大减轻，使移植器官或组织长期存活并发挥功能。当发现移植器官功能的改变时，已属于排斥反应的结果