白斑综合症病毒(WSSV)感染对虾的途径及滴度研究.pdfVIP

第32卷第l期 应用海洋学学报 V01．32．No．1 2013年2月 JOurnalOfApp¨edOceanOgraphy Feb．．2013 白斑综合症病毒(WSSV)感染对虾的途径及滴度研究 戴俊逸，李文婷，杨 丰 (国家海洋局第三海洋研究所、国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室，福建厦门361005) 摘要：本研究利用荧光定量PCR技术，开展了白斑综合征病毒(wssV)感染途径及染病最低病毒浓 度的研究．用病毒分别感染对虾的口腔、鳃、背部甲壳和腹部软壳24 h后，利用qPcR测定血液中的 病毒拷贝数，结果显示病毒主要通过口腔和鳃入侵宿主，并通过血液循环进行全身感染，但病毒不 个／dm3)或含核衣壳的海水中培养，发现当海水中病毒粒子浓度低于102个／dm3时，对虾没有感染 病毒，当浓度达到103个／dm3以上时能引起对虾感染．结果暗示103个／dm3是引起对虾感染的最 低病毒粒子浓度，而核衣壳则不具有感染性． 关键词：海洋生物学；白斑综合症病毒(wssV)；定量PcR；感染途径 DOI：10．3969／J．ISSN．2095_4972．2013．01．009 中图分类号：P735 文献标识码：A 是通过消化道，比如甲肝病毒；呼吸道，比如流感病 白斑综合症病毒(wssV)是对虾养殖业中最常 见也是最具破坏力的致病源．在过去的二十多年中 毒；表皮创口，比如狂犬病毒．对于鱼类病毒，如脾肾 它已经成为了影响对虾养殖最主要的病源，造成了 坏死病毒(IsKNV)，能通过食物、体表感染等方式进 巨大的经济损失¨引．该病毒发病快、致死率高、传 行传播‘”。．然而，对于wSsV而占，通过注射wSSV 播迅速，通常情况下对虾在感染WSSV后大约3～能快速引起对虾发病死亡已得到充分证明．但在自 5d内其死亡率能达到100％．并且wssV有着广泛然状态下病毒入侵宿主的途径目前并不很清楚，可 的宿主包括淡水虾，鳌虾，龙虾，淡水蟹，以及其他海 能通过口腔或者体表途径进入对虾体内．已有报道， 洋蟹类Ⅲ1． wSSV是具有囊膜的杆状型病毒，其基因组是 kb的双链环状DNA，隶属于线形病毒科 一个约300 斑节对虾或长毛对虾组织内提取的病毒粗提液中， (Nimaviridae)，白斑病毒属(贶却彻ir凇)．目前Gen— Bank上公布了3株wssV的基因组序列，分别为在4～6d内实验组对虾都达到了100％死亡率，并 WSSV．CN株(序列号：AF332093)J、WSSV—TH株且通过PCR技术也从死亡对虾体内检测出wSsV． (序列号：AF369029)∞：和WSSV．TW株(序列号：同时用感染wSsV的长毛对虾肌肉喂食给健康的斑 AF440570)一J．对于有囊膜的病毒来说，膜蛋白通常节对虾，受试虾体内在24h检测出wssV阳性，并 参与了病毒粒子的吸附、入侵、包装和释放等过 且5d内全部死亡。14I．何建国等(1999)从感染了白 程¨o，因此对病毒的感染起着至关重要的作用．基 斑病的对虾病体内粗提出病毒液，以喂食和水体感 于wSSV的基因组信息，利用蛋白质质谱技术已鉴染的方式都能使对虾染白斑病而死亡-l5I．王晓洁等 定出超过30多种病毒结构蛋白’9。…．其中VP28、(2005)通过实验证明核衣壳无感染能力¨6‘．以上实 验仅是根据对虾死亡情况来判定wSSV是可以通过 VP26、VP24和VPl9是病毒最主要的囊膜蛋白，它 们之间能形成多蛋白复合体。1卜12。． 摄食和浸泡感染对虾，同时核衣壳无感染力．但目前 通常，病毒水平传播进入宿主体内的主要途径 相关的文献报道缺乏定量数据，一是感染源通常用