宫腔内注射酪蛋白对大鼠胎仔存活的影响：一个新的避孕的药理学途径.doc

宫腔内注射酪蛋白对大鼠胎仔存活的影响：一个新的避孕的药理学途径 ? 48? 基础研究 l文ll文l 001宫腔内注射酪蛋白对大鼠胎仔存活的影响:一个新的避 孕的药理学途径f英]/HalperinR…//Contraception.-2006, 73(5).?641—644 有报道官腔内存在含有人蜕膜相关蛋白(1lDP)200的高 分子量复合物,能与免疫球蛋白聚合.研究显示这些免疫聚 合物可能参与植入过程.在酶联免疫吸附试验中,乳剂特别 是酪蛋白能强烈抑制hDP200与血清免疫球蛋白结合.另外, 近来有报道显示子宫内存在一种Ct2-酪蛋白样物质,促使笔 者验证.酪蛋白在植入过程中的直接作用. 方法:选取1O15周,体质量180—230g的大鼠,喂养于 人工光周期为14h的空气控制房间.每天行阴道涂片检查, 在发现阴道内有精子的当天分笼隔离.第5天将28只大鼠 轻度麻醉.采用背外侧切口外置子宫角.将150P,g牛.酪蛋 白溶于磷酸盐缓冲液(PSS)配置成1mr/mE的酪蛋白溶液, 经官腔注射于一侧宫角,对侧宫角注射150p,LPBS作为对 照.以排除针刺和注射液体对胎仔消融可能起到的非特异性 影响.注射后轻轻钳夹注射部位约30s,以防液体外溢.复位 子宫角,缝合皮肤切口.第6和第7天分别同法处理另8只 和1O只大鼠.第5天还用浓度为0.3mg/mL的.酪蛋白溶 液和PBS分别处理20只大鼠的两侧宫角.另外,第5天还进 行2mU5mg/mL)a.酪蛋白溶液和2mLPBS腹膜内注射的比 较研究.第14天用颈椎脱臼法处死大鼠,通过胎仔大小及大 体表现,计数消融的和成活的胎仔数,用消融胎仔数除以总 植入数作为胎仔消融率. 结果:官腔内注射.酪蛋白溶液的浓度为1rag/mE时, 第5天.酪蛋白侧的胎仔消融率09.5%1显着高于PBS侧 (4o.4%)lt;0.00O01),第6天Ot.酪蛋白侧的胎仔消融率(55.1%) 显着高于PBS侧(37.5%)(Plt;0.05),第7天.酪蛋白侧的胎仔 消融率(45.5%)也显着高于PBS侧(19.0%)(j】lt;0.01),且第6和 7天注射酪蛋白的大鼠中,所有的消融胎仔均在注射部位 附近.当第5天酪蛋白溶液的浓度为0.3rag/mE时,酪蛋 白侧的胎仔消融率(73.1显着高于PBS侧(30.4%)lt;0.00O1). 腹膜内注射.酪蛋白的胎仔消融率(9.1%)与腹膜内注射PBS 的胎仔消融率(3.8%)无显着性差异. 讨论:已知酪蛋白能抑制很多非特异性或低亲和力生物 学反应,还可能与细胞毒T淋巴细胞介导的细胞溶解有关. 更合理的可能性是酪蛋白的非特异性结合能力.抑制了正常 妊娠开始所必需的免疫球蛋白的聚合过程.正如该研究显 示,酪蛋白只有局部作用而无全身性作用.否则每次受孕都 会被内源性或外源性乳剂所打断.微量浓度f1m~mL)的酪蛋 国外医学计划生育,生殖健康分册2007年26卷第1期 l摘l 白即可达到满意的避孕效果,且最佳注射时间为第5天.酪 蛋白用于避孕的确切作用机制有待于进一步研究. (张钰娟摘李奕校) 收稿151期:2006.11-07 临床研究 男性生殖调节 002采用实时定量PCR对AZFb重复区域的初步分析【英】/ WritzlK…//HumReprod.?2006,21(3).?753-754 少弱精因子(AZ1%是Y染色体长臂上的一段基因,其缺 失可引起男性不育.AZFb基因的重复和缺失同样常见,但 是.AZFb区域的重复是否对精子发生有影响尚未见报道.研 究旨在通过实时PCR的方法分析AZFb基因重复对生精功 能的影响. 材料方法:选取150例因男性原因不孕的夫妇:其中79例 为非阻塞性无精症,71例为少精症,所有患者核型分析均正 常另取150例己育有1个以上孩子的男性作对照.采用单管 实时定量PCR的方法快速检测基因量,使用ABIPrism7000 序列检测系统,探针的检测位点为SY125位点或JARID1D基 因.在检测SY125位点的反应体系中:总量25p,L,包括100ng 基因组DNA,12.5p,L的2xTaqmanUniversalPCRMasterMix, 1.25的RNA聚合酶,1.25的PCRReactionMix20x;若 检测JARID1D基因,则把最后一项换为0.416L的PCR ReactionMix60x.PCR反应条件:50℃2min,95℃10min激 活.循环(加次循环):95~C15s,60℃1min,在每次退火/延伸 步骤收集荧光染料. 结果:研究发现3例因少弱精不育的男性被检测出有 AZFb区域的缺失,在对照组中,有2例核型为47,XYY的患 者发现有S~’125位点及JARID1D基因的重复. 讨论:通过大量分析Y染色体的A