单核细胞增生性李斯特菌感染ICR小鼠模型的建立.pdfVIP

中国畜牧兽医 2013年第40卷第9期 生理生化 ·131· 单核细胞增生性李斯特菌感染ICR小鼠模型的建立 尹海畅。吕兴锋。刘思国。王伟。王建超，孟庆文 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，兽医生物技术国家重点实验室实验动物研究室，黑龙江哈尔滨150001) 摘要：单核细胞增生性李斯特菌(Listeria 的感染症状。现广泛使用具有免疫活性的小鼠模型测定半数致死量(LDs。)来评价不同LM菌株的致病性。为建立LM的 ICR小鼠模型，本研究采用I／2a血清型的N21 半，以测定的LDs。剂量接种LM，分别对各组小鼠临床症状、组织病理变化、体重变化及组织中细菌载量进行评价。结果发现， N21 LM菌株对ICR小鼠的LDso为10“25CFU；感染周期为10d左右，感染小鼠出现被毛粗糙、精神萎靡、阴茎垂出及体重下 降等临床症状。组织病理学分析结果显示，肝脏先后出现实质内灶状细菌团块、形成血栓、细胞坏死等；脾脏主要表现为白髓 内淋巴细胞减少；肺脏主要表现为纤维素性肺炎。菌落计数和Real—timePCR的检测结果发现肝脏中细菌载量最高，脾脏次 之。结果表明，ICR小鼠能作为单核细胞增生性李斯特菌的感染模型。本试验结果为研究LM的致病机制、疫苗研究及抗菌 肽转基因小鼠抗LM的评价奠定了基础。 关键词：单核细胞增生性李斯特菌；感染；ICR小鼠模型 中图分类号：$852．61 文献标识码：A 文章编号：1671—7236(2013)09—0131—05 单核细胞增生性李斯特菌(Listeria 羊，并成功的从脑、淋巴结和心血分离到该菌，建立 monocyto— genes，LM)是广泛存在环境中的革兰氏阳性细菌，动物感染模型；但以绵羊作为感染模型常受到价格、 最早于1926年由Murray从患败血症的大鼠和兔品种、年龄及个体差异等因素的限制，且需对绵羊进 子中分离得到(Hamon等，2006)，现已呈世界性分行免疫抑制剂处理。目前，鼠类是最广泛的应用于 布；与多种动物的严重疾病有关，可引起动物不同类 研究LM的动物模型，且在小鼠模型上关于致病机 型的李氏杆菌病，如脑膜炎、败血症、角膜炎、肺炎、 理、毒力因子、感染强度、基因影响因子和评价LM 流产等(Cossart等，2008；Czuprynski等，2003)。为 有效的预防和控制LM的暴发，欧美等很多国家将 2011)。通过静脉注射和腹腔注射的方式接种小鼠 其列入法定的报告疾病，且建立了完善的监测系统 可用来研究一些野生菌株、实验室菌株和基因改造 (冯延芳等，2010)；中国于21世纪初开始监测食品 病大多数都是通过食用污染LM的食物而导致的， 中LM的污染。LM共包括13个血清型，其中I／ 2a、1／2b和4b这3个血清型引起全世界报道的 95％的李斯特菌病病例，而其中大多数病例是由血 LM对小鼠的感染，但与直接感染LM的天然感染 清型4b菌株感染所致，为了评价和研究LM各相关途径相比仍有差异。 毒力因子，通常使用1／2a和1／2c血清型的菌株 本研究通过口腔灌注的方式接种1／2a血清型 N21 (Vines等，1998)。 LM菌株感染6周龄ICR小鼠，测定临床症状、 LM已成为广泛研究细胞内病原菌致病机理和 体重变化、细菌对ICR小鼠的LD。。、组织的细菌含 细胞免疫调控机制的模型。国内曾用LM感染绵 小鼠感染模型，为研究LM的致病机制、疫苗研发 收稿日期：2013-01—29 及抗菌肽转基因小鼠抗LM的评价奠定基础。 作者简介：尹海畅(1988一)，女，黑龙江人，硕士生，研究方向：病1材料与方法 原微生物及分子生物学。 1．1 茵株和试验动物 N21