再生障碍性贫血患者治疗前后骨髓VEGF、bFGF的变化意义.docVIP

精品论文 参考文献 再生障碍性贫血患者治疗前后骨髓VEGF、bFGF的变化意义 陈国忠(娄底市第二人民医院检验科 湖南娄底 417000) 【摘要】目的：观察探讨再生障碍性贫血患者治疗前后骨髓碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的变化情况，总结其临床指导意义。方法：选取我院2005年1月至2012年1月再生障碍性贫血（AA）的患者24例，设为观察组，再选取我院同期体检健康的人群30例，设为对照组，观察对比两组人群和观察组治疗前后用免疫组化方法检测bFGF、VEGF在骨髓组织中的表达情况。结果：观察组骨髓组织中bFGF、VEGF表达水平均显著低于对照组（P＜0.05），具有统计学意义；观察组治疗后骨髓组织中bFGF、VEGF表达水平均显著对比治疗前提高（P＜0.05），具有统计学意义。结论：bFGF、VEGF表达水平可以为临床监测骨髓基质的改善情况，评价疗效提高可靠、客观的临床参考依据。 【关键词】再生障碍性贫血 骨髓 碱性成纤维细胞生长因子 血管内皮生长因子 【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）02-0194-01 再生障碍性贫血(AA)是一种造血微环境和/或骨髓干细胞发生损伤，导致脂肪组织取代了红髓，但确切的发病机制尚未完全明确。而bFGF与VEGF在基质内皮细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞上具有广泛表达。本文通过观察探讨再生障碍性贫血患者治疗前后骨髓bFGF、VEGF的变化情况，总结其临床指导意义如下： 1、材料与方法 1.1 一般资料 选取我院2005年1月至2012年1月再生障碍性贫血（AA）的患者24例，设为观察组，男有13例，女有11例，年龄在12～47岁，中位年龄为46.5plusmn;1.7岁，皆符合《血液病诊断及疗效标准》中的AA诊断标准[1]，选取我院同期体检健康的人群30例，设为对照组，男有14例，女有16例，年龄在11～48岁，中位年龄为46.8plusmn;1.8岁，两组患者的骨髓样本皆为正常肋骨活检取出的骨髓，观察对比两组人群和观察组治疗前后用免疫组化方法检测bFGF、VEGF在骨髓组织中的表达情况。两组患者从年龄、性别的方面进行比较皆无统计学差异（P＞0.05），有可比性。 1.2 方法 1.2.1 标本处理 所有采取的样本皆放置在3.33mol/L的甲醛溶液中进行石蜡包埋并固定，然后进行4～5mu;m的连续切片。 1.2.2 检测方法 使用的是免疫组化SP法进行检测，具体为：先对切片进行常规脱蜡至水，以3%H2O2溶液处理10min对内源性的过氧化物酶进行阻断，加入抗原修复液，置入微波炉中进行加热到2次沸腾，再使用5%的BSA封闭液处理，放置在室温下20min，随之将其加入到一抗的4deg;C湿盒中进行孵育过夜，使用作了生物素标记的二抗37deg;C 中进行20min孵育，经SABC37deg;C下进行20min孵育，致使DAB显色后，采用苏木精进行脱水、复染、透明及封片。阴性对照为PBS代替一抗，阳性对照为已知的阳性片，对细胞质的bFGF、VEGF阳性染色定位；分别参考《血液病诊断及疗效标准》进行判断，分别对黄色、棕黄色、棕褐色界定成弱、中、强三种阳性的表达强度，依次为1、2、3分，然后依据阳性细胞的百分比将分值界定为：0分：lt;1%，1分：1～25%，2分：26～50，3分：51～75%，4分：gt;76%。将两项测定结果的得分进行相乘，计算出总分。 1.3 统计学方法 本研究中bFGF、VEGF表达水平的数据采用的是SPSS13.0统计学系统进行计算，数据间的比较应用均数t检验，Xplusmn;S为计量单位，P＜0.05认为存在差异，有统计学意义。 2、结果 观察组骨髓组织中bFGF、VEGF表达水平均显著低于对照组（P＜0.05），具有统计学意义；观察组治疗后骨髓组织中bFGF、VEGF表达水平均显著对比治疗前提高（P＜0.05），具有统计学意义。见表1 表1两组骨髓组织中bFGF、VEGF表达水平比较[Xplusmn;S，分] 组别 bFGF VEGF 观察组（n=24） 治疗前 1.79plusmn;0.42* 2.0plusmn;0.47* 治疗后 8.66plusmn;0.54# 7.9plusmn;0.53# 对照组（n=30） 8.56plusmn;0.64 7.8plusmn;0.59 *为观察组与对照组比较差异明显（P＜0.05），#为观察组