大药物对离体豚鼠回肠的作用 - 浙江大学基础医学实验教学中心.pptVIP

药物对离体豚鼠回肠收缩的作用 浙江大学医学院生理教研室 目 的 学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。 观察小肠平滑肌的自律性收缩，理解其原理。 观察药物acetylcholine (Ach、乙酰胆碱），histamine (His、组胺），BaCl2分别对离体豚鼠回肠平滑肌的作用，并以atropine(阿托品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）为工具药，初步分析以上药物的作用原理。 原 理（1） 胃肠平滑肌收缩的自动节律性（慢波理论：Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果）。 原 理（2） 乙酰胆碱：M胆碱能受体激动药。Ach与M受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流↑，肌浆[Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高。 阿托品：M胆碱能受体阻断药。阿托品与平滑肌细胞膜M受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体的激动作用。 原 理（2） 组胺：激动平滑肌细胞膜H1受体，通过激活G蛋白-磷脂酶C系统，使细胞内Ca2+增高，导致平滑肌收缩。 扑尔敏：H1受体阻断药。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合，阻断组胺与H1受体结合，从而阻断组胺对H1受体的激动作用。 原 理（3） 氯化钡：肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆，使肌浆[Ba2+]↑，平滑肌收缩幅度增高，但泵出障碍；另一方面BaCl2能兴奋胆碱能受体，使平滑肌收缩幅度增高。 材 料 豚鼠1只：WT为300 g左右 麦氏浴槽，生物信号采集系统，张力换能器。 台氏液， 10-2 g/L乙酰胆碱 、1 g/L硫酸阿托品、 10-2 g/L组胺， 10-3 g/L扑尔敏、10 g/L BaCl2 溶液。 方 法 1. 实验装置准备： 打开恒温水浴37℃---加台氏液于麦氏浴槽中---95% O2+5%CO2持续通气（气泡一个个逸出为宜）。 2. 标本准备： 击昏豚鼠---开腹---减取回肠---冲洗内腔---截取肠段--- 肠段两端对角穿线--- 固定于麦氏浴槽和换能器上。 3. 实验记录： 打开配置（药物对离体豚鼠回肠的作用）---零点设置---调节换能器张力2 g ---稳定10-30分钟（基线和收缩幅度稳定） 标本准备（2） 取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角处分别用缝针穿线，并打结。一端系于浴槽固定钩上，另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 观察项目 记录肠段基础张力，收缩张力，收缩频率。 加入10-2 g/L Ach 0.2ml，观察并记录曲线，作用明显时换液。 重复以上Ach剂量，待收缩到最高点时加入1 g/L阿托品 0.2ml，观察曲线，此时不换液，待曲线基本稳定后，再加入相同量的Ach，观察并记录收缩曲线，换液。 加入10-2 g/L组胺 0.3ml，作用明显时迅速换液。 预先加入10-2 g/L扑尔敏0.2 ml，5 min后（不换液）加入同量组胺，观察并记录收缩曲线 ，换液。 加入10 g/L BaCl2 溶液1ml，当作用达到最高点，加入1 g/L阿托品 0.2 ml，观察并记录收缩曲线。 实验结果 注意事项 注意保持肠管通畅，勿使其封闭。 不要把药物直接滴加到回肠上。 每次加的台氏液量保持相等。 加的台氏液量必须预先加热到37℃。 药物作用明显后，尽早冲洗。 每次换液后稳定10－20min。 实验结果（1） 曲线描记：标上加药时间点，药物名，洗脱时间点。 对曲线进行测量：基础张力，收缩张力。填入表格。 实验结果（2） 实验报告 针对实验数据，进行结果描述 总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体豚鼠回肠有什么作用。 2. 讨论和结论 分析Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2对离体豚鼠回肠平滑肌的作用机理。 3. 参考文献 如：[1]陆源，夏强. 生理科学实验. 浙江大学出版社，2004，245-247 * * 张 雄 找到盲肠，在离回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于盛有冰冷台氏液的培养皿中，冲洗干净，将回肠剪成1-1.5cm的几小段。 标本准备（1） 换能器 肠管 Ach 换液 Ach 阿 Ach 换液 His 换液 扑 His Bacl2 阿 (每次换液后稳定15min) 稳定20min 表3. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响 组别