干蟾皮醇提物对a549和ncih460肺癌细胞活性-上海中医药杂志社.pdfVIP

上海中医药大学学报　第３０卷　第４期　２０１６年７月 ·５７· 实验中医 ＤＯＩ：１０．１６３０６／ｊ．１００８８６１ｘ．２０１６．０４．０１４ 干蟾皮醇提物对Ａ５４９和ＮＣＩＨ４６０ 肺癌细胞活性的影响 １ ２ 罗建江 ，李向林 １．新疆医科大学附属中医医院呼吸科，新疆呼吸病研究重点实验室　（新疆　乌鲁木齐　８３００００） ２．新疆医科大学直属医院银川路社区卫生服务中心全科三　（新疆　乌鲁木齐　８３００００） 【摘　要】　目的：观察干蟾皮醇提物抗肺癌细胞生长和促凋亡的作用。方法：将Ａ５４９、ＮＣＩＨ４６０肺癌细胞 悬液分别接种于９６孔培养板中，细胞贴壁后依次加入不同浓度的含干蟾皮醇提物培养液干预，并设 ＲＰＭＩ １６４０培养液空白对照组。实验结束，用ＭＴＴ法测定药物对细胞增殖的影响，Ｈｏｅｃｈｓｔ荧光染色法检测对细 胞凋亡的影响。结果：与空白对照组比较，干蟾皮醇提物在不同浓度下对Ａ５４９和ＮＣＩＨ４６０细胞的生长均 有抑制作用（Ｐ＜０．０５～０．００１），且呈浓度依赖性；对两种细胞的半数抑制浓度（ＩＣ ）分别为１５ ｇ／ｍｌ和 ５０ μ １．５ ｇ／ｍｌ。不同浓度的干蟾皮醇提物作用于Ａ５４９、ＮＣＩＨ４６０细胞后，随着药物浓度梯度的增加，凋亡细 μ 胞数目明显增加，伴随出现细胞的坏死，细胞轮廓不清，甚至细胞解体。结论：干蟾皮醇提物可显著降低 Ａ５４９和ＮＣＩＨ４６０细胞的活性及促进其凋亡，且呈剂量依赖性。 【关键词】　干蟾皮；肺癌；Ａ５４９；ＮＣＩＨ４６０；细胞活性；体外实验 　　肺癌是目前发病率和病死率最高的恶性肿瘤， 利水消胀的功能。张景岳《本草正》论蟾蜍有“消癖 全世界每年约新增 １３８万例肺癌患者，有 １００多万 气积聚，破坚肿胀”，《本草纲目拾遗》记载其有 肺癌患者死亡。在中国，肺癌每年大约致４０万例患 “贴大毒，能拔毒、收毒”等作用；现代药理研究显 ［１］ 者死亡 ，其中非小细胞肺癌（ｎｏｎｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇ 示，干蟾皮具有抗肝癌、胰腺癌、肺癌、胃癌、宫颈 ｃａｎｃｅｒ，ＮＳＣＬＣ）占到全部肺癌比重的８０％～８５％， 癌、大肠癌等作用［４］。本文就干蟾皮醇提物抗肺癌 ［２］ ５年生存率不足１５％ 。自２０世纪９０年代开始， 细胞生长、促肺癌细胞凋亡做了相关体外实验研 循证医学理念推动了肺癌治疗的规范化，主张采用 究，以期为干蟾皮抗肺癌的生长和转移提供一定的 严格的临床流行病学方法，诸如手术、化疗、放疗、 基础。 分子靶向以及免疫治疗等多种方法，但肺癌的预后 仍不理想，易复发转移，患者５年生存率得不到明显 １　 材料与方法 提高。中药治疗肿瘤具有多途径、多靶点、多效应 １．１　 实验材料　 的综合作用，其抗肺癌的机制主要包括抑制肺癌细 １．１．１　 细胞株　 人肺腺癌 Ａ５４９细胞株、人大细 胞增殖、抗肿瘤细胞转移、免疫调节以及抗肺癌多 胞肺癌细胞ＮＣＩＨ４６０，均购自于中国科学院上海细 ［３］ 药耐药性 ，其中诱导肺癌细胞凋亡、抑制肺癌细 胞研究所，由新疆呼吸病研究重点实验室保存。 胞增殖是目前研究中草药抗肺癌最主要的研究手 １．１．２　 仪器、设备与试剂 　 倒置荧光显微镜 段，而且中医药已经被写入我国２０