丙泊酚对心肺复苏大鼠脑组织含水量和水通道蛋白-4的影响.docVIP

精品论文 参考文献 丙泊酚对心肺复苏大鼠脑组织含水量和水通道蛋白-4的影响 高润兴 林文静 仲吉英 李甲莲 李世杰 刘林生 周俊 (佛山市第一人民医院 广东佛山 528000) 【摘要】目的 探讨丙泊酚对大鼠脑组织含水量和水通道蛋白-4(AQP4)表达的影响。方法 96只雄性SD大鼠随机分为对照组（N组）、复苏组（C组）及丙泊酚治疗组（P组）。丙泊酚治疗组在ROSC后立即腹腔注射丙泊酚60mg/kg。每组在心脏骤停（CA）建模前1h、自主循环恢复(ROSC)后1、3、6h各时间点分别取8只大鼠，应用免疫组化测定脑组织AQP4表达，干湿质量法测定脑组织含水量(BWC)。结果 与N组组间比较，C组、P组在ROSC后1h、3h、6h，脑含水量、脑组织AQP4表达明显增高，Plt;0.05；与C组组间比较，P组在ROSC后1h、3h、6h，脑含水量明显增高，脑组织AQP4表达明显降低，Plt;0.05；C组、P组在ROSC后1h、3h、6h的脑含水量、脑组织AQP4表达与CA前1h组内比较明显升高，Plt;0.05。结论 丙泊酚可减轻心肺复苏后脑水肿，其机制可能是降低了AQP4的表达。 【关键词】 心肺复苏 脑 水通道蛋白-4 丙泊酚 【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）29-0087-02 丙泊酚广泛用于重症监护病房(ICU)镇静和临床麻醉，不仅具有麻醉作用，而且对大脑等脏器有一定的保护作用。心肺复苏后早期已出现脑组织含水量的增加，并且伴有水通道蛋白-4(aquaporin-4，AQP4)表达的上调[1]。本研究采用窒息大鼠心搏骤停心肺复苏模型，探讨丙泊酚对脑组织含水量及脑组织AQP4表达的影响。 1 材料与方法 1.1 实验仪器及试剂：动物呼吸机；多导心电监护仪；万分之一电子分析天平；兔抗大鼠AQP4多克隆抗体；丙泊酚注射液。 1.2 实验动物及分组：健康雄性SD大鼠96只，体质量(341plusmn;41)g，由佛山市第一人民医院动物实验中心提供。随机分为对照组（N组）、复苏组（C组）及丙泊酚治疗组（P组）。丙泊酚治疗组在ROSC后立即腹腔注射丙泊酚60mg/kg。N组大鼠行气管切开插管，放置股动、静脉导管，但不进行窒息。C组、P组：同N组手术准备后，呼气末夹闭气管导管模拟窒息，P组在ROSC后即丙泊酚(60mg/kg)腹腔注射。每组在CA前1h、自主循环恢复(ROSC)后1、3、6h各时间点分别取8只大鼠，应用免疫组化测定脑组织AQP4表达，干湿质量法测定脑组织含水量(BWC)。 1.3 心肺复苏模型的建立：心肺复苏模型参照Hendrickx等[2]所建立的方法进行，并加以改进。3.6%水合氯醛(1mL/100g)腹腔注射麻醉，将大鼠固定于操作台上，气管切开插管，以24G套管针行股动、静脉置管，股动脉置管成功后接压力换能器。采用呼气末夹闭气管导管模拟窒息，CA判定标准:收缩压(SBP)le;25 mmHg并持续3min。此后，开始复苏，予机械通气（呼吸频率60次/min，潮气量7ml/kg和氧浓度100%)，同时以食指和中指进行胸外心脏按压，频率200次/min，按压深度为大鼠胸廓前后径的1/3。复苏开始10s后，经股静脉注射肾上腺素(0.01mg/kg)。ROSC的标志：出现自主心律和SBPge;60mmHg并持续10 min以上[4]。P组在复苏后即刻腹腔注射丙泊酚60mg/kg。 1.4 脑组织含水量（brain water content, BWC）测定：在观察时点以10%氯化钾2ml静脉注射处死大鼠后，切开胸骨暴露心脏，直视下将穿刺针经左心室穿入升主动脉，剪开右心耳，经心脏快速灌注生理盐水250ml至右心房流出液变清，迅速断头取脑。取左侧大脑，用电子天平称取湿质量后，在80℃电热恒温干燥箱内烘烤72h，获取脑组织的干质量。脑组织含水量(BWC)=[(湿质量-干质量)/湿质量]times;100%。 1.5 脑组织AQP4表达的测定：取右半脑，置于10%中性甲醛溶液中固定24h。以冠状面将大脑从前向后连续切成A、B、C、D脑片，脑片厚度约2mm，石蜡包埋各脑片，常规切片。应用兔抗大鼠AQP4多克隆抗体及SABC试剂盒进行免疫组织化学染色。对免疫组化显色的面积比（目标面积/统计场面积，△S）进行量化处理。 1.6 统计学方法：使用SPSS11.5统计软件进行数据处理，计量资料以均数plusmn;标准差(xplusmn;s)表示，采用单因素方差分析。计数资料采用卡方检验。Plt;0.05为差异有统计学意义。 2 结果