临床实验室室内质量控制精讲.ppt

PCR温度曲线图 SAT的优势（RNA扩增） 同一温度下，首先通过M-MLV反转录酶产生靶标核酸（RNA）的一个双链DNA拷贝； 然后利用T7?RNA多聚酶从该DNA拷贝上产生多个（100～1000个）RNA拷贝； 每一个RNA拷贝再从反转录开始进入下一个扩增循环； 带有荧光标记的探针和这些RNA拷贝特异结合，产生荧光； 机器读取荧光值计算产物浓度。 SAT技术优势 一、先进的恒温扩增技术? 扩增在一个温度下进行（42℃），无需热循环。 二、领先的?RNA?检测技术 SAT?技术直接以病原体特异性RNA为扩增靶标，以扩增产物RNA 为检 测靶标，因RNA的存在时间段，对活动性进行感染有诊断意义。 三、更高的检测灵敏度和准确性 SAT技术的扩增效率极高，15～30分钟即可将模板扩增109倍，检测灵 敏度和准确性远高于其他核酸检测技术?。 四、有效减少假阴性结果 SAT技术采用M-MLV逆转录酶和T7?RNA多聚酶进行核酸扩增，相对于 其它核酸扩增技术，反应抑制物更少，有效减少假阴性结果。 五、有效的解决了扩增产物的污染问题 扩增产物的污染是核酸检测的控制难点。SAT技术采用实时荧光闭管检 测，使污染得到有效控制；即使污染产生，由于扩增产物为RNA?，环境中 极易降解，从而大幅度提高检测结果的可靠性。? 六、大大降低了核酸扩增实验室的要求 一、实践经验告诉我们，实验室要高效、准确的完成各种繁重的工作任务，仅仅依靠领导和共产党员的模范带头作用是不够的，必须依靠科学管理，将人力资源进行科学分配，实施全员岗位责任制，科主任起领导、管理的作用，而不是忙于日常事务，忙于每天替班、接班。 二、临床实验室现在面临一个矛盾：“检验质量”和“经济支出”，若单纯追求经济效益使用价廉质差的试剂、材料、质控品、标准品，必然造成检验质量的下降，肯定是不对。 经济支出管理的原则是——以保证检验质量为前提，其次是经济效益。 三、质控品和标准品的选择是影响检验质量核心和关键，不能以次充好，做“室内质控”和“室间质评”无论做多少次，也不得巧立名目乱收费。 正态分布 在医学领域中有许多变量的頻数分布是中间（靠近平均数） 的頻数多，两边的頻数少，越靠近平均数，越符合正常的机率高， 而且左右对称，此种分布叫做正态分布。 那么医学卫生工作中又有许多指标近似服从正态分布，相应 的我们实验室中所测样本数据中的随机误差等也服从正态分布（这 是实验室做质量控制，将随机误差控制在均数加减N倍标准差范围 内的理论基础） 还有一些数据虽不服从正态分布，但可以通过转换，如求对 数log值转换后服从正态分布，被称为对数正态分布，实验室所测样 品不论单位是IU/ml或Copies/ml，浓度均较高，不容易计算，故都 经log转换后再分析。 平均数、标准差、变异系数 描述定量资料分布规律的指标有三类 一类是：平均数X（集中趋势） 一类是：标准差S（离散趋势） 一类是变异系数CV%. 变异系数 CV =（ 标准差 S÷ 平均值 X）× 100% 算数平均数X： 平均数X的公式是：所有样本数据之和（∑x）除以样本个数n. 它是用来描述一组资料的集中趋势的。 标准差S是怎么来的： S是用来表示样本资料的离散趋势的，实际上是求每个样本值与平均值差值的平均数。质控品的标准差与精密度或随机误差有关，质控品的均值与准确度或系统误差有关。 一、公式是所有数据减去平均数（离均差）之和除以n-1(自由度)。 缺点是离均差之和为零！ 二、为了解决，公式改为离均差先平方再相加除以n-1(自由度)。 缺点是数据平方之后太大，不利于统计处理！ 三、数据再开方求出算数根，这就是最终的标准差S ，标准差S和算术平均数是有相同单位的，某个数据距离均数的距离可以用1S、2S、3S……来表示！ 四、控制限 是判断质控品测定结果允许范围的上、下限，通常以标准差的倍数表示 X±S范围曲线所占頻数是68.27%X±1.64S范围曲线所占頻数是90.90% X±1.96S范围曲线所占頻数是95.00%X±2S范围曲线所占頻数是95.45%X±3S