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2017-12-14 发布于河北
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天然属性抗LDL及oxLDL IgM亚类抗体的制备与鉴定.pdf

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天然属性抗LDL及oxLDL IgM亚类抗体的制备与鉴定

1043 现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine Vol.11 NO.6 MAR.2011 · · 天然属性抗LDL 及oxLDL IgM 亚类抗体的制备与鉴定* 1 2 3 3 3 3 3△ 袁媛徐瑞芬何争李成祥李静霞王海昌冯旭阳 1 710032 2 710032 （第四军医大学病理与病理生理学陕西西安；口腔医院麻醉科陕西西安； 3 西京医院心脏内科陕西西安710032）摘要目的：制备天然属性抗低密度脂蛋白(LDL)及抗氧化低密度脂蛋白(oxLDL)IgM 亚类抗体。方法：给予Babl/c 小鼠高胆固醇 4 SP2/0 LDL oxLDL ELISA 饮食，周后取脾细胞直接与细胞融合，以纯化的及为抗原，对阳性杂交瘤细胞生长孔进行间接筛选。鉴定杂交瘤上清的免疫球蛋白亚类，进而采用免疫沉淀和免疫印迹法对获得的抗体进行免疫学反应性鉴定。结果：杂交瘤细胞分 LDL oxLDL ELISA LDL oxLDL 4 泌的抗及抗的天然抗体通过法被筛选出来，可以与或发生高亲和力结合，经过次克隆化，最 2 LDL 5G8 2H7 1 oxLDL 3A6 3 IgM 终获得株稳定分泌天然抗的抗体，命名为和，及株稳定抗的抗体，命名为，株抗体均属于亚类，无交叉反应，可以满足免疫印迹、免疫沉淀等实验要求。结论：成功制备了抗LDL 及抗oxLDL IgM 亚类抗体，为研究天然抗体在体内脂质代谢和相关心脑血管疾病如动脉粥样硬化等发生发展中的作用提供了重要的研究工具。关键词：天然抗体；单克隆抗体；杂交瘤技术；低密度脂蛋白；氧化低密度脂蛋白 Q95-3 R543.5 A 1673-6273 2011 06-1043-05 中图分类号：，文献标识码：文章编号：（） Generation and Identification of Natural Monoclonal Antibodies against LDL and oxLDL* 1 2 3 3 3 3 3△ YUAN Yuan , XU Rui-fen , HE Zheng , LI Cheng -xiang , LI Jing -xia , WANG Hai-chang , FENG Xu -yang ( 1 Fourth Military Medical Unive