细菌内毒素检测技术与应用-安度斯.pdfVIP

湛江安度斯生物有限公司 细菌内毒素检测技术与应用 熊向党 冯聚锦 韦 群 年 月 第一稿 2007 6 湛江安度斯生物有限公司 广东省湛江市人民大道中 号 邮编 ： 38 524022 电话 ： 传真 ： 0759-3380672 0759-3391072 网址 ： 电邮 ：zacb@ 湛江安度斯生物有限公司 目 录 一、细菌内毒素检测技术的应用与发展·························································2 二、细菌内毒素检查的基础理论···································································5 三、凝胶法细菌内毒素检查技术·································································12 四、光度法细菌内毒素检查技术 ·································································27 五、细菌内毒素检查的常见干扰及消除·······················································42 六、细菌内毒素检查法在药品生产质控的应用············································45 七、辅剂及相关产品的使用 ········································································50 八、细菌内毒素检查常用术语、符号及英文缩写 ·········································54 - 1 - 湛江安度斯生物有限公司 一、细菌内毒素检测技术的应用与进展 1、热原 2、历史回顾——鲎试剂与细菌内毒素检查 3、BET的发展趋势与特点 1、热原 –热原是指临床上引起哺乳动物发热反应的物质 –Webster将热原定义为“致热剂” 1 ）早期的热原研究 – 静脉疗法的研究与热原的研究密切相关 – 在18、19世纪有很多关于静脉疗法的报道 ，所有病人在注射后都伴随有发热反应 ，当时的医生都深信发热对人体有益 – 1912年 ，Hort和Penfold阐明注射发热的真正本质 ，将细菌分为热原和非热原两种 ： • 革兰氏阴性细菌为热原细菌 • 革兰氏阳性细菌为非热原细菌 – 他们推断出所有的注射发热都是由革兰氏阴性细菌产生的可滤过的、热稳定的物质导致的 2 ）热原的检测 – 1941年 ，美国USP、FDA和NIH （美国国家卫生研究所）邀请了14个制药厂商参与第一次热原的协作研究 – 1942年 ，美国药典第一次收载热原检查法 – 该方法是将一定量的供试品通过静脉注入家兔体内 ，在规定时间内 ，观察家兔体温升高的情况来判定供试品中所含热原量是 否符合规定。 3 ）细菌内毒素检查 （BET ） – 利用鲎试剂来检测由革兰氏阴性菌产生的细菌内毒素 ，用以判断供试品中细菌内毒素含量是否符合规定 2、历史回顾——鲎试剂与细菌内毒素检