小牛血及小牛血清去蛋白提取物注射液的质量对比研究.pptVIP

国内外小牛血及小牛血清去蛋白提取物注射液的质量对比研究 中国药品生物制品检定所 任丽萍 Contents 小牛血去蛋白提取物注射液 小牛血去蛋白提取物注射液和小牛血清去蛋白注射液是国内缺血性脑血管疾病神经保护治疗的主要制剂。该注射液为新鲜小牛血经去蛋白、浓缩、超滤等工艺制得的含有无机物及小分子有机物的无菌水溶液。 可增强组织细胞对氧及葡萄糖摄取与利用，改善细胞乏氧状态和机体内环境，增加心、脑、肝等脏器的血流量，改善微循环。 用于脑缺血、脑痴呆、脑外伤及大脑功能不全等脑细胞代谢障碍性疾病的治疗。 进口药品---爱维治 小牛血经过二次超滤和在102℃以医用活性碳处理等，然后制成只含有分子量低于6000道尔顿活性物质的爱维治浓缩品, 因此，爱维治不含有蛋白质病毒等致病因子，也不含BSE（牛海绵状脑病）致病因子（分子量约为20000—30000道尔顿）。 爱维治通过促进细胞对葡萄糖的摄取和利用（不依赖于胰岛素）增加细胞对氧的摄入和利用，从而使ATP生成增加，使细胞能量提高，在机能缺陷、代谢受抑制的情况下和能量需求增加时，在细胞水平促进细胞能量代谢、改善细胞功能，从而使血流供应增加。  小牛血去蛋白提取物注射液 国外该注射液的代表产品---丹麦奈科明制药公司生产的爱维治；该产品每年进口额为几千万美元，位列进口药品排名前列； 在国内，也有黑龙江、吉林、湖北、陕西、上海等地约18余家医药企业生产该类药品。近年来，我国医药企业也在药品生产工艺等方面进行了相关的探索，因此，也有小牛血清去蛋白注射液进入市场。 产品介绍（进口小牛血去蛋白提取物注射液） 产品介绍 产品介绍 产品介绍 质控情况介绍 研究内容 氨基酸及多肽含量的分析研究 常见无机金属离子的含量分析研究 HPLC、CZE、LC-MS法对各产品进行初步分析 瓦氏呼吸仪测定呼吸活力 试验方法 样品收集 试验方法 注射剂中含有的氨基酸可进入组织细胞参与蛋白质的合成代谢，获得正氮平衡，并生成酶类、激素、抗体、结构蛋白，促进组织愈合，恢复正常生理功能； 测定氨基酸的方法很多，目前常用的是异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生测定氨基酸的方法 ； 通过水解前后氨基酸含量的比较可以测算出注射液中的多肽的含量； 此外，因为本注射剂中并不含有蛋白质，本研究还采用福林酚法检测注射剂中的多肽的含量，并将两种方法测得的多肽含量进行对比。 1.仪器 Waters高效液相系统：2478双波长紫外检测器，1525二元泵，在线脱气机，TCM柱温箱，Empower液相工作站。岛津UV-2550紫外分光光度计，恒温水浴锅。 2.对照品 18种氨基酸标准品：1.Asp2.Glu3.Ser4.Gly5.His6.Arg7.Thr8.Ala9.Pro10.Tyr11.Val12.Met13.Cys14.Ile 15.Leu16.Phe17.Trp18.Lys (中国药品生物制品检定所) 内标：正亮氨酸 （中国药品生物制品检定所） 表5. 18种氨基酸的线性方程、线性范围及检测限 表6. 样品的游离氨基酸与水解氨基酸测定结果(μg·mL-1) 表6续. 样品的游离氨基酸与水解氨基酸测定结果(μg·mL-1) 表7 .各样品中含量相对较多的氨基酸 讨论 本文采用PITC作为衍生剂的HPLC法测定氨基酸含量，结果稳定，用于氨基酸的质量检测控制，效果令人满意； 采用正亮氨酸作为内标物，不仅因为它与18种常见氨基酸有相同的色谱行为，而且正亮氨酸的保留时间与其它氨基酸不重叠； 由于牛源的不同，各产品氨基酸的种类还存在差别，这可能与各厂家的牛源产地不同所致，同时地域、气候等方面的差异也会对牛源品质有一定的影响； 根据表6和表8的结果可以看到，与爱维治相比，国内大多数产品多肽含量相对比较低； 讨论 作为投入到市场已有十余年之久的爱维治，其在脑血管疾病、痴呆、颅脑外伤等疾病的治疗的疗效已经得到了广泛的认可。而对于国内同类注射液的疗效研究方面，无资料表明能超过爱维治疗效的报道，由于小分子多肽是该注射液的有效成分之一，故该含量对注射液的疗效有较大的影响； 虽然国内有一企业产品多肽含量较高，但未见该产品比爱维治疗效好的报道 ； 本文的实验结果为是否将小分子多肽含量列入标准积累了基础数据。 常见的无机金属离子的含量分析研究 常见的无机金属离子的含量分析研究 仪器与标准液 1.仪器 岛津AA-6800原子吸收分光光度计，GFA-EX7石墨炉，ASC-6100自动进样器，待测各元素空心阴极灯（日本岛津），热解涂层高密纵向石墨管（日本岛津），Wizard原子吸收数据工作站。 2.标准液 钾、钠、钙、镁、铜、铁、锌的标准液（购于国家标准物质研究中心,其中钾、钙、镁、铜离子的标准液为1000μg·mL