病毒性传染病的检测与预防.pptVIP

病毒性传染病的实验室诊断 概述 标本的采集和处理 病毒性疾病病原学诊断 病毒性疾病的诊断辅助检查 病毒性疾病诊断活组织检查 一、概述 大多数感染性疾病都是由病毒引起的，已经证实对人有致病性的病毒达500余种。近年来病毒的诊断技术迅速发展，已逐渐形成病毒学研究的一支重要分支-——诊断病毒学。由于大多数病毒尚无有效治疗药物，实验室诊断已成为控制病毒流行和蔓延的重要手段。 随着病毒学研究的不断深入，病毒病的诊断方法已由最初单一的分离病毒发展到病毒血清学、分子生物学、 电子显微镜技术等更加敏感、特异、简便的诊断方法。 （一）病毒病诊断的一般原则 病毒病诊断技术的发展大致可分为病毒分离、经典血清学、现代免疫学和分子病毒学四个阶段。 1、病毒的分离 2、经典血清学方法 3、现代免疫学技术 4、分子生物学技术 包括中和试验 补体结合试验 红细胞凝集试验等。 包括ELISA 固相放射免疫试验 IFA 酶免疫学试验 免疫胶体金试验和WB 此外还有免疫电泳、免疫粘连试验等。 包括核酸杂交 凝胶电泳技术 PCR 基因芯片 核苷酸序列测定 （二）诊断标志的选择 诊断标志的选择是指根据病毒的生物学性状、潜伏期的长短，以及机体的免疫应答，选择检测病毒抗原、抗体或病毒核酸等作为诊断的指标。 1、对潜伏期较短的病毒，由于机体未能就病毒感染产生相应的抗体，因此，应选择检测病毒颗粒或病毒性抗原及病毒核酸。 2、对可在机体内形成持续感染或潜伏感染的病毒，如单纯疱疹病毒感染等，可检测病毒双份血清的IgG抗体滴度有无4倍改变，或检测病毒核酸。 3、对可由多种病毒感染引起的同一症状，应同时检测几种相关病毒抗原或抗体，以免延误诊断。 4、对病因不明，可能有新病毒感染时，应根据感染部位采集相应的标本做病毒分离，以便发现新的病原，同时应采集双份血清来确定分离病毒是否为病原病毒。 5、对多型别的病毒可检测属特异性病毒抗原或抗体进行诊断，必要时再进一步分型。 6、对潜伏期10d以上的病毒感染，检测特异性IgM抗体作感染指标。发病初期检测病毒抗原是病毒性疾病快速诊断的最佳方法。 二、标本的采集和处理 （一）标本的选择 一般检测病毒抗体应采集外周血分离血清（或血浆），对可能的神经系统感染还应采集脑脊液做特异性抗体或抗原检测；少数病毒感染还可以采集唾液检测病毒抗体（如HAV、HIV）。 进行病毒分离或直接检测病毒应视部位而决定采集何种标本。 呼吸道感染一般采集鼻拭子、咽拭子含漱液等； 肠道感染可采集粪便、肛拭子、直肠拭子； 出现疱疹的可采集疱疹液； 其他病毒如巨细胞病毒（CMV）、风疹病毒等还可采集尿标本。此外，如眼分泌物、精液，各种活检、尸检标本等可以作为病毒检测的标本。 （二）不同标本的采集和用途 1、血清学标本 用于病毒特异性抗体的检测。 如检测特异性IgM抗体可采集单份急性期血清，特异性IgG抗体检测应采集急性期和恢复期双份血清， 急性期标本采集越早越好（可延于发病后1周）， 恢复期血清标本则于发病后2周或更迟一些采集。 采集血清标本时取静脉血2.0～3.0ml，不加防腐剂或抗凝剂，4℃保存，分离血清后可于－20℃保存数年至数十年。 2、粪便标本 用于病毒分离或病毒抗原、核酸的检测。取5～10g粪便置于灭菌的带盖玻璃瓶或蜡纸盒内，采集时间越早越好，一般不能迟于发病后7～10d。 3、尿液标本 取新鲜尿液10～20ml置灭菌玻璃瓶内，可用CMV的分离和检测，有时也用于风疹病毒和腺病毒的检测。发病时采集，可采集2～3次以增加检出机会。 4、鼻拭子和咽拭子标本 用于呼吸道感染病毒的分离。用干棉拭子准确地擦拭患者的鼻咽部后，立即浸泡于含2～3ml样品保存液的灭菌试管中，标本采集不能迟于发病后5d。 5、含漱液标本 用于病毒分离。 6、唾液标本 用于病毒分离或抗体检测，用灭菌平皿或广口瓶留取唾液5～10ml，或用棉拭子沾两颊黏膜及舌底擦拭留取。 7、脑脊液标本 用于病毒分离或抗体检测。分离病毒时取样不迟于发病后7～10d，无菌取样1～2ml。 8、眼拭子标本 用于病毒的分离或直接检出。将棉拭子以生理盐水蘸湿后挤干，在眼结膜部取分泌物后，浸于2～3ml保存液中。 9、疱疹液标本 用于病毒的分离或直接检出，在出疹后3d内采集，将疱疹表面用生理盐水轻轻冲洗，然后用注射器或棉拭子采集疱疹液。 10、抗凝血液标本 用于病毒分离，无菌试管中加1/1000肝素1ml，抽血9ml。 11、各种活检和尸检标本 用于病毒的分离或直接检出，