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实验一 显微镜构造 临时玻片的制作
植物学实验 植物学实验的有关注意事项 座位及显微镜使用安排 课程的学时安排 考核、考察要求 实验报告的上交要求 值日安排 发放实验用工具盒(登记编号) 镊子(1) 解剖针(2) 双面刀片(1) 放大镜(1) 小手巾(1) 载玻片(4) 盖玻片(4) 实验内容 (一)显微镜的构造与使用方法 (二)显微镜临时玻片的制作 (三)植物细胞的绘图法 一、实验目的要求 掌握显微镜的构造及原理,熟练使用光学显微镜。 了解显微镜使用的基本要求、注意事项及一般维 护方法。 学习临时玻片制作及掌握生物绘图的基本要求及方法。 (一)显微镜的构造和使用方法 分辨率: 能分辨清楚的物体的最小的两点中心的距离,称为分辨率。 人肉眼的分辨率最高可达:0.1~0.2mm 光学显微镜的分辨率最高可达:0.2μm 电子显微镜的分辨率最高可达:0.2nm 1mm=1000 μm=1000 000nm 显微镜放大倍数=物镜放大倍数 x 目镜放大倍数 光镜的有效放大倍数可达1250倍 透射电子显微镜 用途: 观察细胞内部的超微结构 放大倍数:300万倍 分辨率:约为0.3纳米 透射电子显微镜----观察植物细胞的超微结构 扫描电子显微镜 用途: 观察器官、组织表面的形态和结构 放大倍数 分辨率 1、光学显微镜的构造 光学系统 物镜 目镜 聚光器 虹彩光圈 光源(或反光镜) 一、光学显微镜的构造 (一)机械部分: 1、镜筒:镜筒的作用是保护成像配合保持一定的距离,一般 160mm。 2、物镜转换器:安装低倍和高倍物镜 3、 粗调焦螺旋:位于镜柱两侧的一对大螺旋,用于调节焦距,旋转一周可使载物台上升或下降 10 mm 4、细调焦螺旋:与粗调焦螺旋同轴的一对小螺旋,旋转一周可使载物台上升或下降0.1mm 5、镜座:方形金属座,用以稳固和支持镜身。 6、镜座:方形金属座,用以稳固和支持镜身。 7、镜臂:亦称执手,连接镜筒与镜柱,是用于执镜的部位。 8、载物台:放置玻片的平台,中央有一通光孔、有固定制片的压片夹和推进器 一、光学显微镜的构造 (二)光学部分: 由成像系统和照明系统组成。成像系统包括物镜和目镜,照明系统包括反光镜和聚光器 1、目镜: 2、物镜:装在物镜转换器和上,短者为低倍镜( 4× 、 10× ),长者为高倍镜( 40× ),其上刻有N.A 0.25 0.5等,为数值孔径(光线经过盖玻片引起折射后成光锥底面的口径数值,数值越大,吸收光线量越多,越清楚), 3、聚光器: 4、光圈: 5、照明器或反光镜: 二、光学显微镜的使用 1、低倍镜的使用方法 (1)取镜和放置: (2)对光:打开电光源,用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动),使低倍镜对准镜台的通光孔 。左眼在目镜上观察 (右眼睁开),同时调节反光镜方向,直到视野内的光线均匀明亮为止。 ( 3)放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一面朝上,将所要观察的部位调到通光孔的正中。 (4)调节焦距:双手转动(向后,载物台上升 )粗调节器(在内,大调解螺旋),使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处 ,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升 ,然后,两眼同时睁开,用左眼在目镜上观察,向前缓慢转动粗调节器,使载物台缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。 如果物象不在视野中心可调节推片器将其调到中心 。 光学显微镜的使用 高倍镜的使用方法 : (1)选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。 (2)转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。 (3)调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器(在外、小螺旋)的螺旋移动(向后)约0.5-1圈,即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!) 果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节, 更换玻片标本或取玻片时,必须向前转动粗调节器(切勿转错方向)使载物台下降,方可取下玻片标本。 二、光学显微镜的使用 三、显微镜的维护 1、经常性的维护 (1)防潮如果室内潮湿,光学镜片就容易生霉、生雾。 (2)防尘光学元件表面落入灰尘,不仅影响光线通过,而且经光学系统放大后,会生成很大的污斑,影响观察。 (3)防腐蚀 显微镜不能和具有腐蚀性的化学试剂放在一起。如硫酸、盐酸、强碱等。 (4)防热 防热的目的主要是为了避免热胀冷缩引起镜片的开胶与脱落。 三、显微镜的保护 2、光学系统的擦拭光学部分用用
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