两株对虾育苗用益生芽孢杆菌的筛选和鉴定温崇庆1水生生物学报.pdfVIP

第 31 卷 第 4 期 水 生 生 物 学 报 Vol 3 1 ,No 4 2 0 0 7 年 7 月 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA July , 2 0 0 　7 两株对虾育苗用益生芽孢杆菌的筛选和鉴定 1 ,2 2 3 1 2 温崇庆 　赖心田 　何 　红 　薛 　明 　周世宁 ( 1 广东海洋大学水产学院 ,湛江 　524088 ; 2 中山大学生命科学学院 ,广州 　510275 ; 3 广东海洋大学农学院 ,湛江 　524088) 8 摘要 :从土壤和虾池中分离到 22 株具有不同特征的芽孢杆菌 ,分别将各菌株对数期约 5 ×10 个细胞添加到 500mL ( ) 6 预先加有凡纳滨对虾 L itopenaeus vannamei 无节 Ⅲ期幼体 的水体 中 , 各菌株在初始水体 中含量均约为 10 个细 胞/ mL ,根据各菌株对无节 Ⅲ期到蚤状 Ⅱ期幼体变态成活率的影响 ,从中初步筛选出 10 株对幼体变态成活有极显 ( ) 著 p 001 效果的芽孢杆菌 。进一步又从初筛到的 10 个菌株中复筛到 2 株对幼体变态成活最为明显的芽孢杆 ( ) 菌 ,菌株 zou4 和 zou8 。两菌株与复筛的其他 8 株芽孢杆菌相比 ,均显著 p 005 促进幼体变态存活率 。根据形态 ( ) ( ) 和生理生化特征 ,菌株 zou4 和 zou8 分别初步鉴定为坚强芽孢杆菌 B acillus f irmus 和蜡状芽孢杆菌 B cereus 。为 进一步确定 zou4 和 zou8 的分类地位 ,测定了两菌株的 16S rRNA 基因序列 ,分析了相关细菌 16S rDNA 序列的同源 性 ,构建了系统发育树 。结果表明菌株 zou4 和 zou8 分别与坚强芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌的同源性最高 ,相似值均 为 99 %以上 。系统发育树上 zou4 和 zou8 也分别与坚强芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌聚为一类 。综合上述结果 ,芽孢 杆菌 zou4 和 zou8 菌株分别被鉴定为坚强芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌 。 关键词 : 益生菌 ;芽孢杆菌 ;筛选 ;鉴定 ;凡纳滨对虾 ;幼体 ( ) 中图分类号 :S9171 　　文献标识码 :A 　　文章编号 2007 　　随着高密度集约化水产养殖业迅猛发展 ,养殖 的22 株芽孢杆菌 ,是从湛江市广东海洋大学附近肥 水体自身和外源污染加剧 ,使用化学药物产生负面 沃农田土壤和东海岛凡纳滨对虾海水养殖池底泥中 作用 。因此 , 目前生态养殖 日益受到重视 ,特别是益 最初分离纯化的芽孢杆菌 ,根据来源 、形态和生理生 生